jueves, 30 de enero de 2014

204- Estudio de caso clínico- Anemia hemolìtica

Brian Nagao Shan Yuan, Marjorie Bon Homme. Aparición repentina de anemia severa en una paciente con fibrosis quística. Clinical Chemistry, 2012; 58:9: 1286–1291.

Preguntas a considerar

1. ¿Qué pruebas se utilizan para diagnosticar anemia hemolítica?
2. ¿Qué pruebas de laboratorio sugieren que la anemia hemolítica en esta paciente es mediada por el sistema inmune?
3. ¿Qué es lo inusual acerca de un patrón pan-reactivo en la detección de anticuerpos con un resultado negativo eluído?
4. ¿Cómo afecta la cirrosis hepática a la evaluación de la hemólisis en el laboratorio?

Caso

Una mujer de 26 años se presentó con neumonía aguda, enfermedad en estado terminal de pulmón secundaria a una fibrosis quística, cirrosis secundaria a hepatitis C y diabetes mellitus dependiente de insulina. Fue tratada con piperacilina/tazobactam y tobramicina. Se incluyeron otros medicamentos como dexametasona, bumetanida, pantoprazol, dormasa e insulina.

 Durante el ingreso al hospital, el hematocrito de la paciente era de 30.8%. En el día 8 de su hospitalización, desarrolló anemia severa con un hematocrito de 11.5%. Su tipo de sangre era grupo A, Rh D-positivo y los resultados del examen de detección de anticuerpos (realizado con solución, baja en iones, en fase sólida), y que previamente había sido positivo solamente para el anticuerpo anti E, ahora eran positivos con un patrón- pan reactivo. El resultado de la prueba de anti globulina directa (DAT)3 fue (moderadamente positivo) para IgG, y el eluido no era reactivo. 

Se requirieron seis unidades de glóbulos rojos (RBC) para la transfusión. Su plasma tenía una incompatibilidad débil-moderada en una prueba cruzada con unidades de antígeno E y  todos los positivos del grupo A. Dada la gravedad de la anemia, se dieron 6 de estas unidades de manera urgente para transfusión con el fin de estabilizar a la paciente mientras se continuaba la investigación sobre la anemia y otros nuevos hallazgos.

Discusión

Es probable que solamente 2 mecanismos fueran responsables de un descenso tan abrupto y severo en el hematocrito: hemorragia y hemólisis. Inicialmente, se sospechaba que había sangrado; sin embargo, no se encontró ninguna fuente de hemorragia. Por otro lado, los hallazgos de laboratorio revelaron alta actividad de lactato deshidrogenasa (LDH), hemoglobinuria e hiperbilirubinemia conjugada; todos estos hallazgos son indicativos de hemolisis. El resultado DAT positivo indicaba una etiología inmune. El patrón pan-reactivo del resultado del panel de anticuerpos sugirió auto anticuerpos calientes. Pero el eluído no reactivo eliminó esta posibilidad debido a que la pan-reactividad también debería ser observada en el eluido. El anticuerpo anti E primero detectado en el ingreso al hospital indica que la paciente había recibido una transfusión o había estado embarazada en cierto momento de su vida. Sin embargo no existían antecedentes de transfusión reciente y el eluido era no reactivo, resultados que indicaban que una reacción tardía a una transfusión hemolítica era altamente improbable............................
  

(*) Este blog de bioquímica-clínica  no tiene avisos ni persigue fin de lucro alguno. Está destinado a profesionales bioquímicos y médicos;  la información que contiene es de actualización y queda a criterio y responsabilidad de los mencionados profesionales, el uso que le den al mismo.

sábado, 25 de enero de 2014

203- Secuenciación pre-natal

Perspectiva

Ilana R. Yurkiewicz, Bruce R. Korf, Lisa Soleymani Lehmann. SEcuenciacion Prenatal del genoma- ¿Es ético su investigación en el futuro de un feto?. 
N Engl J Med 2014; 370:195-197

Recientemente, los investigadores informaron la secuenciación de un genoma fetal a partir de ADN fetal libre en células en sangre de una mujer embarazada, anunciando la posibilidad de llevar a cabo la secuenciación del genoma ya en el primer trimestre del embarazo. Esta posibilidad añade un nuevo nivel de complejidad a las decisiones sobre las pruebas prenatales. Los métodos actuales como el muestreo y la amniocentesis en vellosidad coriónica, que debe ser realizada por médicos, proporcionan información acerca de las condiciones médicas específicas. 

Con este avance, los futuros padres pueden llegar a obtener la información genética no sólo por el riesgo de enfermedades de la infancia, sino también sobre el estado de portación de trastornos autosómicos recesivos, como la enfermedad de Tay-Sachs, el riesgo de las enfermedades del adulto complejas como la diabetes, la presencia de genes que causan enfermedades autosómicas dominantes del adulto como el cáncer de mama hereditario y el síndrome de cáncer de ovario, y la probabilidad de rasgos tales como la calvicie.  Por tanto, tal secuenciación podría desdibujar la frontera entre el diagnóstico y la detección de riesgo de enfermedad en el futuro. Los padres pueden aprender sobre el riesgo de enfermedades que nunca se podrían manifestada y sobre las variaciones genéticas de significación incierta.

Esta innovación plantea cuestiones éticas y políticas. ¿Deben las mujeres permitir la secuenciación prenatal de todo el genoma? ¿Deben los padres tener acceso a toda la información genética del feto?  El fundamento de la detección genética actual de los niños se basa en proporcionar un beneficio médico directo para el niño. Los recién nacidos son examinados para detectar las principales enfermedades que se pueden evitar mediante la institución de tratamiento antes de que aparezcan los síntomas. La renuencia a proporcionar a los padres el acceso a otros tipos de información genética, incluidos los ensayos de condiciones intratables al inicio de su estado adulto, se ha basado en la percepción de anular los daños al niño. Preocupaciones comunes incluyen la carga psicológica de la información sobre los padres y los niños, el daño a la autoestima, la alteración de la visión de una familia ante el niño, la estigmatización y la discriminación. 

La secuenciación del genoma completo puede resultar del hecho de hallazgos inesperados, como la paternidad no-atribuida, junto con los resultados de importancia clínica desconocida. El enfoque estándar para intervenciones sin beneficio médico inminente ha sido cauteloso,  al no respetar los derechos del niño de no saber y como decidir más tarde en su vida, para obtener información genética.

Sin embargo, los avances en el diagnóstico, han generado una discusión sobre la ampliación de los criterios de selección. Un informe de 2005 de la American College of Medical Genetics (ACMG) reiteró que la intervención terapéutica para el niño es la principal justificación para la investigación - pero reconoció que esa intervención podría definirse más ampliamente que el tratamiento inmediato.  El informe analiza el ejemplo de la discapacidad intelectual , para los que la intervención temprana puede conducir a resultados menos graves. 

Los padres podrían beneficiarse de los resultados de la identificación de un riesgo genético a sus familiares o de los futuros embarazos. .Los beneficios sociales incluyen avances en la investigación biomédica a partir de datos que caracterizan la incidencia y la historia natural de las enfermedades genéticas y los efectos de la intervención. Además el diagnóstico genético precoz, también podía prescindir del sistema de salud en costosas intervenciones diagnósticas……………………


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lunes, 20 de enero de 2014

202- Screening neonatal

Susan Sparks. Actualización sobre screening neonatal.
North Caroline Med. J. 2013;. 74 (6) :514-517

Desde la aparición de la  preuba de fenilcetonuria en la década de 1960, el screening neonatal se ha expandido para incluir  más de 30 patologìas. Este comentario ofrece una actualización de evaluación del recién nacido, incluyendo el seguimiento de los resultados anormales, las limitaciones de dicho examen, y las cuestiones éticas que plantea este tipo de detecciòn.

El examen neonatal se inició en la década de 1960 como una forma de investigar trastornos que no tenian características clínicas identificables pero que podría ser tratado con éxito si la terapia se iniciaba rapidamente. Este estudio involucra la obtención de una muestra de sangre durante las primeras 24 a 48 horas de vida y  buscar  marcadores indicativos de diversos trastornos. Un requisito de tal selección es que cada trastorno debe tener  un marcador sensible y fiable que puede ser detectada mediante un test simple y de bajo costo.

El prototipo de evaluación del recién nacido, que fue también el primer trastorno que se investigò es la fenilcetonuria (PKU), que es un error innato del metabolismo del aminoácido fenilalanina. Esta patologìa sin tratamiento inmediato, llevan a la discapacidad intelectual grave, sin embargo, si se inicia una dieta baja en proteínas restringida en fenilalanina en las primeras semanas de vida, entonces el desarrollo intelectual sigue siendo normal o casi normal. 

El metodo inicial de la PKU era un ensayo de inhibición bacteriana desarrollado por Robert Guthrie, que se basa en colocar una muestra de sangre en un placa con bacterias que no pueden crecer en presencia de altos niveles de fenilalanina. Si hay demasiada fenilalanina en la muestra, el crecimiento de las bacterias se inhibe, y la muestra aparecerá estar rodeado de un "halo", un área donde no hay bacterias. El diámetro de la zona sin crecimiento bacteriano es directamente dependiente de la cantidad de fenilalanina. Si se utilizan las concentraciones de control de fenilalanina en el mismo ensayo, entonces la cantidad de fenilalanina en las muestras analizadas se puede cuantificar. Este método se utilizo rapidamente para la investigación del  “jarabe de arce”, enfermedad que se detecta en la orina indicando niveles elevados de leucina y para la homocistinuria para la detección de niveles elevados de metionina). En la década de 1960, 37 Estados de la Uniòn, tenían leyes que apoyan el cribado neonatal de la fenilcetonuria.

En la década de 1990, en el screening neonatal aparece la espectrometria de masa en tandem (MS/MS) utilizando electronebulización. Esta metodología permite la detecciòn de múltiples analitos a ser detectados en una sola muestra de sangre in situ. Además de medir los niveles de fenilalanina, leucina, metionina, el MS / MS puede medir los niveles de otros aminoácidos para identificar ciertos defectos del ciclo de la urea: citrulinemia, aciduria arginosuccínico, hiperargininemia, y los 3 tipos de tirosinemia. Un perfil de acilcarnitina realizado por MS / MS también permite la detección de muchos acidemias orgánicas, los defectos de la oxidación de ácidos grasos, la captación de carnitina y defectos del transportador………………….


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N.R. Los kit reactivos para diagnostico uso in vitro e instrumentos mencionados en este trabajo, son comercializados en Argentina por ETC Internacional- C.A.B.A  http://www.etcint.com.ar

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miércoles, 15 de enero de 2014

201- Bilirrubina y kernicterus

Jon F. Watchko, Claudio Tiribelli. Daño neurológico inducido por bilirrubina. Mecanismos y enfoques en su control.  N Engl J Med 2013; 369: 2021-2030.

Introducción

La hiperbilirrubinemia neonatal no conjugada y la ictericia clínica resultante afectan hasta un 85% de los recién nacidos. Aunque esta condición es generalmente un fenómeno de transición benigna, los niveles de bilirrubina no conjugada que pueden suponer una amenaza directa de la lesión cerebral grave se desarrollan en una pequeña proporción de recién nacidos

¿Qué es Kernicterus?

El kernicterus, ictericia nuclear o encefalopatía neonatal por bilirrubína es una complicación  neurològica grave causada por la elevación de los niveles normales de bilirrubina en la sangre del neonato. Anatómicamente es una condición neurológica discapacitante que clásicamente se caracteriza por los trastornos extrapiramidales del movimiento diatónico, coreoactetosis o ambas, la pérdida de la audición debido a los trastornos neuropáticos auditivos, y paresias oculo-motoras. Esas secuelas del sistema nervioso central (SNC) se reflejan en la topografía regional neuropatología inducida por bilirrubina, que implican al globo pálido, el núcleo subtalámico, a los núcleos del tronco cerebral, las neuronas CA2 del hipocampo, y a las células de Purkinje del cerebelo.

¿Que tipo de bilirrubina es neurotóxica?

La decisión de tratar a un niño con hiperbilirrubinemia con el objetivo de prevenir la toxicidad aguda de la bilirrubina se basa  principalmente en la concentración de bilirrubina total en suero [Bi]s. Sin embargo este nivel solo tiene un valor limitado para predecir el kernicterus y el deterioro neurológico. La [Bi]s  esta principalmente  unida a la albúmina; la pequeña fracción libre en circulación  que no está unida a la albúmina u otras proteínas de suero es proporcional al nivel de bilirrubina circulante.

Este nivel de bilirrubina libre es un índice más fiable del riesgo de neurotoxicidad que la [Bi]s. A pesar de que la bilirrubina circulante libre tiene efectos neurotóxicas en el cerebro, este nivel por sí solo no dicta el riesgo de encefalopatía bilirrubina. La neurotoxicidad inducida por bilirrubina dependiente, es una compleja interacción entre dicho nivel y la duración de la exposición del SNC a la bilirrubina libre y a las características celulares innatas del SNC en desarrollo, que pueden conferir una predisposición o protección contra la lesión neuronal inducida por bilirrubina.

Evaluación en el laboratorio clínico

La  medición de bilirrubina-libre circulante no es una técnica de fácil acceso en el laboratorio clínico. La técnica más común, que es el método de la peroxidasa , requiere  dilución de la muestra, lo que resulta en una subestimación del nivel de circulación de la bilirubina libre.  Esta técnica para evaluar el nivel de bilirrubina circulante no unido en plasma se han propuesto y utilizado para predecir la lesión del SNC inducida por la bilirrubina.

En los recién nacidos, la relación de la bilirrubina sérica total (mg/ dL)/ albúmina sérica (g/ dL) se correlaciona con los niveles circulantes de bilirrubina y se ha utilizado como una medición sustituta, lo que  ha sido avalado por la Academia Americana de Pediatría. Sin embargo , la evidencia preliminar de estudios prospectivos, aleatorizados y multicéntricos realizada en los Países Bajos indican que esta relación comparado con el de  [Bi]s no fue significativamente importante para evaluar y prevenir el desarrollo neurológico en neonatos prematuros

Este hallazgo subraya la importancia de mejorar, estandarizar y validar técnicas para medir la bilirrubina libre circulante, así como la importancia de la realización de ensayos controlados para examinar las definiciones y los umbrales para el tratamiento sobre la base de los niveles de bilirrubina libre, en comparación con los niveles de bilirrubina total en suero.........................


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viernes, 10 de enero de 2014

200- CALIPER en Pediatrìa

Mathew P. Estey, Ashley H. Cohen, David A. Colantonio, Man Khun Chan, Tina Binesh Marvasti, Edward Randell, Edgard Delvin, Jocelyne Cousineau, Vijaylaxmi Grey, Donald Greenway, Qing H. Meng, Benjamin Jung, Jalaluddin Bhuiyan, David Seccombe, Khosrow Adeli. “Basados en el CLSI  se ha tranferido los intervalos de referencia pediatricos de la base de datos CALIPER obtenidos en las pruebas realizadas en la plataforma Abbott a las plataformas Beckman, Ortho, Roche y Siemens Clinical Chemistry: Validacion directa   utilizando muestras de referencias del cohorte CALIPER”
Elsevier Clin. Biochem. 2013;46 (13-14), 1197-2119

Resumen

- Los Intervalos de referencia CALIPER fueron trasferidos a cuatro plataformas de química clínica
- Los Intervalos de referencia transferidos fueron validados mediante el análisis de muestras CALIPER
- Esta base de datos deberá permitir la aplicación global de los intervalos de referencia CALIPER


El programa CALIPER estableció recientemente una base de datos completa de los intervalos de referencia pediátricos sexo-estratificada y por edad de 40 marcadores bioquímicos . Sin embargo, esta base de datos sólo era de aplicación directa para los ensayos de la Arquitectura Abbott. Por lo tanto, se tratò  de ampliar el alcance de esta base de datos para los ensayos bioquímicos de otros principales fabricantes, lo que permite una aplicación mucho más amplia de la base de datos CALIPER

Diseño y métodos

Sobre la base de la CLSI C28-A3 y directrices EP9-A2, los intervalos de referencia CALIPER fueron transferidos (utilizando criterios estadísticos específicos) a los ensayos realizados en otras cuatro plataformas de química clínica de uso común que incluian Beckman Coulter DxC800, Ortho Vitros 5600, Roche Cobas 6000, y Siemens Vista 1500. Los intervalos de referencia resultantes se sometieron a una validación exhaustiva utilizando 100 muestras de referencia (niños sanos de la comunidad y los adolescentes) del bio-banco CALIPER, y todos los centros de pruebas participaron en una evaluación externa de la calidad (EQA).


Resultados

En general, los intervalos de referencia pediátricos transferidos fueron similares a los establecidos en nuestro estudio anterior. Sin embargo, se observaron diferencias-ensayo específico en los límites de referencia para muchos analitos, y en algunos casos fueron considerables. Los resultados de la evaluación general EQA imitaban las similitudes y diferencias en los límites de referencia entre los ensayos de los cinco fabricantes. Además, la mayoría de los intervalos de referencia transferidos se validaron mediante el análisis de muestras 


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domingo, 5 de enero de 2014

199- Cuestionamiento al Colesterol LDL

 Opinión

Rodney A. Hayward, Harlan M. Krumholz . Tres razones para abandonar el Objetivo de lipoproteínas de  baja densidad.  Carta abierta a la Adult Treatment Panel IV of the National Institutes of Health. Circulation: Cardiovascular Quality and Outcomes. 2012; 5: 2-5

Las guías clínicas actualizadas para las pruebas y administración del colesterol (Panel de Tratamiento de Adultos IV (ATP) del Expert Panel on Detection, Evaluation, and Treatment of High Blood Cholesterol están en desarrollo y  se publicará este año. Estas influyentes directivas están organizados y financiados por el National Heart, Lung, and Blood Institute (NHLBI) y tienen  el visto bueno del Gobierno Federal. En esta versión, el NHLBI tiene el objetivo declarado de integrar un conjunto de directivas sobre Reducción del Riesgo Cardiovascular

Un objetivo principal de la versión anterior de las directivas del  ATP III, fue una estrategia de tratamiento de los pacientes sobre la base de niveles colesterol-lipoproteína (LDL) de baja densidad. ATP III declaró que "los ensayos clínicos recientes muestran que la terapia con firmeza reduce el LDL y el riesgo de cardiopatía coronaria (CHD). Por estas razones, el ATP III continúa identificando el colesterol LDL elevado como el objetivo principal de la terapia para reducir el colesterol. Como resultado de ello, los objetivos principales de la terapia y de los puntos de corte para iniciar el tratamiento se expresan en términos de LDL." 

Este razonamiento, diverge de la evidencia clínica, y recomienda un enfoque que no se puso a prueba en un ensayo clínico. La investigación de resultados promueve la necesidad de demostrar su beneficio antes de hacer recomendaciones para la intervención médica. Con ese  espíritu,  presentamos una carta abierta al Comité ATP IV donde se exponen las razones de por qué las nuevas directrices deberían abandonar el paradigma del tratamiento sobre la base de este Objetivo .

Estimado Comité IV,

Le escribimos para solicitarles que abandonen el paradigma del tratamiento de los pacientes sobre la base de tomar como Objetivo los valores de LDL-Colesterol, y utilicen una postura basada en la   clínica basada en la evidencia actual. 

Cambiar  creencias arraigadas nunca es fácil, incluso cuando la necesidad de cambio se basa en pruebas sólidas. El cambio es especialmente difícil cuando las creencias previas están firmemente arraigados en la cultura, son aceptadas como dogma, y ​​codificado en los libros, artículos, guías, anuncios de servicio público, y medidas de rendimiento. Aun así, lo que es más importante es que los comités de directivas siguen un proceso que se adhiere estrechamente a la evidencia científica, en particular a los datos de los ensayos clínicos que son abundantes al respecto............................


Paginas relacionadas: N° 31

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