martes, 30 de marzo de 2021

764- NGS para Mycobacterium tuberculosis fármaco-resistentes

Dae-Hyun Ko, Eun Jin Lee, Su-Kyung Lee, Han-Sung Kim, So Youn Shin, Jungwon Hyun, Jae-Seok Kim, Wonkeun Song, Hyun Soo Kim. Aplicación de la secuenciación de próxima generación para detectar variantes de Mycobacterium tuberculosis farmacorresistente: correlación genotipo-fenotipo. Ann Clin Microbiol Antimicrob. 2019; 18: 2. Department of Laboratory Medicine, Hallym University College of Medicine, Chuncheon, South Korea.

Resumen

Antecedentes:  La resistencia del Mycobacterium tuberculosis a los medicamenteos (MTB) es un problema de salud importante en todo el mundo. Recientemente, se ha comenzado a utilizar la tecnología de secuenciación de próxima generación (NGS) para detectar genes de resistencia de MTB. Nuestro objetivo fue evaluar la utilidad clínica del panel de investigación del TB -Ion S5 NGS para detectar la resistencia a MTB en pacientes coreanos con tuberculosis.

Métodos:  Se aislaron cepas de Mycobacterium tuberculosis de muestras clínicas con varios perfiles de resistencia a los medicamentos, incluidas cepas susceptibles (N=36). Los ácidos nucleicos se extrajeron del medio de cultivo inactivado y se sometieron a NGS a base de amplicones para detectar variantes de resistencia en ocho genes (gyrA , rpoB , pncA , katG , eis , rpsL , embB e inhA ). Los datos de estudios anteriores que utilizaron el mismo panel se combinaron para producir valores combinados de sensibilidad y especificidad para detectar la resistencia a los medicamentos en comparación con los métodos basados ​​en el fenotipo.

Resultados: Las reacciones de secuenciación fueron exitosas para todas las muestras. Se consideró que un total de 24 variantes estaban relacionadas con la resistencia y 6 de ellas eran nuevas. La concordancia entre los resultados fenotípicos y genotípicos fue excelente para isoniazida, rifampicina y etambutol, y fue pobre para estreptomicina, amikacina y kanamicina. Los valores predictivos negativos fueron superiores al 97% para todas las clases de fármacos, mientras que los valores predictivos positivos variaron (44% a 100%). Existía la posibilidad de que no se pudieran detectar mutaciones comunes debido a su baja cobertura.

Conclusiones:  Aplicamos con éxito NGS para el análisis genético de resistencias a fármacos en MTB, así como para cepas susceptibles. Obtuvimos listas de polimorfismos y posibles polimorfismos, que podrían servir de guía para futuras pruebas de aplicación de NGS en laboratorios de micobacteriología. Al analizar los resultados de NGS, se debe considerar el análisis de cobertura de cada muestra para cada gen y polimorfismos benignos no relacionados con la resistencia a los medicamentos.

Introducción

La tuberculosis (TB) es una enfermedad infecciosa causada por el Mycobacterium tuberculosis (MTB) y es uno de los problemas de salud más importantes en todo el mundo. Aproximadamente 10,4 millones de casos incidentes de tuberculosis ocurrieron en 2016; la mayoría de ellos procedían de la Región de Asia Sudoriental, seguida de las Regiones de África y el Pacífico Occidental. La tuberculosis ha causado más de 1,6 millones de muertes en todo el mundo y es la novena causa principal de muerte. El control epidemiológico de la tuberculosis, especialmente las cepas resistentes a los medicamentos, es uno de los problemas más desafiantes a nivel mundial.

Se han utilizado varios métodos para detectar la susceptibilidad de MTB a varios tipos de fármacos, desde ensayos de fenotipado hasta ensayos de genotipado. Para la determinación del fenotipo de la farmacorresistencia, se pueden utilizar métodos proporcionales y métodos de concentración absoluta. Los métodos fenotípicos generalmente requieren de varias semanas a varios meses para realizarse, ya que requieren el cultivo de MTB, que es un microbio de crecimiento lento. Para superar este problema, se han utilizado métodos genotípicos para detectar resistencias a fármacos en MTB que son ensayos de sonda lineal y el ensayo Xpert MTB/RIF (Cepheid, Sunnyvale, CA, EE. UU.) Son métodos de genotipado representativos para detectar la resistencia a los fármacos..........

Leer el articulo completo

(*) Una vez que esta en la pagina del articulo, pulsando el botón derecho puede acceder a su  traducción al idioma español. Este blog de bioquímica-clínica está destinado a profesionales bioquímicos y médicos; la información que contiene es de actualización y queda a criterio y responsabilidad de los mencionados profesionales, el uso que le den a la misma. Las páginas de este blog , se renuevan dentro de 5 días en forma automática. Cordiales saludos. 
Dr. Anibal E. Bagnarelli,
Bioquímico-Farmacéutico-UBA.
Ciudad de Buenos Aires, R. Argentina


jueves, 25 de marzo de 2021

763- Helicobacter pylori: resistencia a los antibióticos

Alessia Savoldi, Elena Carrara David Y. Graham, Michela Conti, Evelina Tacconelli. Prevalencia de la resistencia a los antibióticos en Helicobacter pylori : una revisión sistemática y un metanálisis en las regiones de la Organización Mundial de la Salud. Gastroenterology. 2018 Nov; 155(5): 1372–1382.e17. Division of Infectious Diseases, Department of Internal Medicine I, German Center for Infection Research, University of Tübingen, Germany.

Resumen

Antecedentes y objetivos:   En 2017, the World Health Organization (WHO.OMS) designó al Helicobacter pylori resistente a la claritromicina como una alta prioridad para la investigación y el desarrollo de antibióticos. Sin embargo, no existen datos claros sobre la distribución global de la resistencia o sus efectos clínicos. Realizamos una revisión sistemática y un metanálisis para evaluar la distribución de la resistencia de H. pylori a los antibióticos de uso común y medir la asociación entre la resistencia a los antibióticos y el fracaso del tratamiento.

Métodos;   Se realizaron búsquedas en las bases de datos de publicaciones en busca de estudios que evaluaran las tasas de resistencia de H. pylori a claritromicina, metronidazol, levofloxacina, amoxicilina o tetraciclina. Las estimaciones combinadas de la resistencia primaria y secundaria y los intervalos de confianza (IC) del 95% se agruparon por región de la OMS. La asociación entre la resistencia a los antibióticos y el fracaso del tratamiento se midió mediante la extracción de datos sobre la eficacia del tratamiento en pacientes con cepas aisladas resistentes y susceptibles y agrupando los odds ratios con IC del 95%.

Resultados:   Identificamos 178 estudios, que comprenden 66142 aislamientos de 65 países. Las tasas de resistencia primaria y secundaria a claritromicina, metronidazol y levofloxacina fueron mayor de 15% en todas las regiones de la OMS, excepto la resistencia primaria a claritromicina en las Américas (10%; IC del 95%, 4% -16%),  la región de Asia Sudoriental (10%). %; IC del 95%, 5% -16%) y resistencia primaria a levofloxacina en la región Europea (11%; IC del 95%, 9% -13%). Hubo una heterogeneidad considerable (mayor de 75%) entre todos los análisis; esto podría deberse al agrupamiento de las tasas de resistencia por país. Se observó un aumento de la resistencia a los antibióticos en la mayoría de las regiones de la OMS. La resistencia a la claritromicina se asoció significativamente con el fracaso de los regímenes que contienen claritromicina (razón de posibilidades, 6,97; IC del 95%, 5,23 a 9,28; p <0,001).

Conclusiones;  La resistencia de H. pylori a los antibióticos ha alcanzado niveles alarmantes en todo el mundo, lo que tiene un gran efecto sobre la eficacia del tratamiento. Se requieren redes de vigilancia locales para seleccionar regímenes de erradicación apropiados para cada región.

Introducción

La infección por Helicobacter pylori (HP) es una de las infecciones bacterianas crónicas más comunes en los seres humanos y afecta aproximadamente a 4.400 millones de personas en todo el mundo.  Los informes de tasas de prevalencia de infecciones varían ampliamente entre regiones geográficas, alcanzando los niveles más altos en los países en desarrollo y mostrando una relación bien establecida con el nivel socioeconómico y las condiciones de higiene.  La infección por HP causa inflamación gástrica progresiva crónica y una variedad de enfermedades, incluidas úlceras gástricas y duodenales y cáncer gástrico. 

Entre 1994 y 2009, the International Agency for Research on Cancer clasificó a HP como carcinógeno del Grupo 1 sobre la base de una revisión exhaustiva de los estudios epidemiológicos y de laboratorio relevantes. El cáncer gástrico es la quinta neoplasia maligna más común y la tercera causa principal de morbilidad relacionada con el cáncer a nivel mundial, y constituye el 9% de toda la mortalidad relacionada con el cáncer. Se ha demostrado que la erradicación de la infección por HP reduce la incidencia de cáncer gástrico.  

La eficacia del tratamiento de erradicación de HP ha disminuido drásticamente debido a la resistencia a los antibióticos. Con raras excepciones, los regímenes que contienen claritromicina en todo el mundo ya no son adecuados para el uso empírico incondicional debido a tasas de erradicación inadecuadas  (menor de 80%). Aún más preocupante, la eficacia de las alternativas disponibles (como los regímenes cuádruples, secuenciales, concomitantes y triples que contienen levofloxacino) ha variado mucho y, aunque los informes de consenso internacional más recientes recomiendan encarecidamente la selección del tratamiento en función de patrones de resistencia local, las pruebas de HP rara vez se realizan.

El objetivo principal de esta revisión sistemática y metaanálisis fue evaluar la prevalencia y la tendencia de 10 años de la resistencia primaria y secundaria de HP a los antibióticos comúnmente prescritos para la erradicación de la infección por HP en todas las regiones de OMS. El objetivo secundario fue medir la asociación entre la resistencia a los antibióticos y la imposibilidad de lograr su erradicación...........

Leer el articulo completo

(*) Una vez que esta en la pagina del articulo, pulsando el botón derecho puede acceder a su  traducción al idioma español. Este blog de bioquímica-clínica está destinado a profesionales bioquímicos y médicos; la información que contiene es de actualización y queda a criterio y responsabilidad de los mencionados profesionales, el uso que le den a la misma. Las páginas de este blog , se renuevan dentro de 5 días en forma automática. Cordiales saludos. 
Dr. Anibal E. Bagnarelli,
Bioquímico-Farmacéutico-UBA.
Ciudad de Buenos Aires, R. Argentina



sábado, 20 de marzo de 2021

762- Resistencia anti-microbiana: enfoque bioinformático

Pieter-Jan Van Camp, David B. Haslam, Aleksey Porollo. Enfoques bioinformáticos para la comprensión de los mecanismos moleculares en la resistencia a los antimicrobianos. Int J Mol Sci. 2020; 21(4): 1363. Department of Biomedical Informatics, University of Cincinnati, Cincinnati, USA.

Resumen

La resistencia a los antimicrobianos (RAM) es un problema de salud importante en todo el mundo. Se necesita una mejor comprensión de los mecanismos moleculares subyacentes. Los avances en la secuenciación del genoma completo y otras tecnologías instrumentales no sesgadas de alto rendimiento para estudiar la patogenia molecular de las enfermedades infecciosas permiten la acumulación de grandes cantidades de datos que son susceptibles de análisis bioinformático y el descubrimiento de nuevas firmas de RAM. En este trabajo, revisamos métodos representativos publicados en los últimos cinco años para definir los principales enfoques desarrollados hasta la fecha en la comprensión de los mecanismos de RAM. Se discuten las ventajas y limitaciones de las aplicaciones de estos métodos en las pruebas de laboratorio clínico y la investigación básica.

1. Introducción

La resistencia a los antimicrobianos (RAM) contribuye al fracaso del tratamiento con antibióticos (AB) y al aumento de las tasas de mortalidad en diversas enfermedades infecciosas. El uso indebido de AB específico y el uso excesivo de AB de amplio espectro se atribuyen a la aparición de RAM, que en algunas cepas da como resultado una resistencia a múltiples fármacos (RMF). A medida que los organismos RMF se vuelven más comunes en entornos clínicos, se necesita una evaluación rápida y precisa de la susceptibilidad a los antibióticos para iniciar un tratamiento eficaz lo antes posible. Sin embargo, todavía no se han descubierto o comprendido todos los mecanismos moleculares subyacentes a la RAM, especialmente en las bacterias Gram negativas. 

Esto significa que actualmente la forma más confiable de evaluar la resistencia a AB en los laboratorios de microbiología clínica es hacer crecer organismos en cultivo, exponerlos a diversas concentraciones de antibióticos y evaluar el impacto en el crecimiento. Este enfoque puede variar desde un día hasta varias semanas, dependiendo de la tasa de crecimiento del patógeno. Algunas especies ni siquiera crecen en medios de cultivo conocidos. Este proceso relativamente lento no está en línea con las demandas clínicas actuales sobre la toma de decisiones rápida y, por lo tanto, los métodos alternativos para la evaluación de la RAM basados ​​en información genética y molecular subyacente han sido el cambio de enfoque.

Décadas de investigación sobre diversos mecanismos moleculares de la RAM han revelado decenas de genes de resistencia a antibióticos (ARG) o variantes de genes bacterianos asociadas con la resistencia fenotípica a AB. Un ejemplo es el NCBI  (Bacterial Antimicrobial Resistance Reference Gene Database- Accession ID:PRJNA313047). La resistencia se puede desarrollar de muchas formas, dependiendo del objetivo. La Figura 1 del articulo, muestra una descripción general de alto nivel de los objetivos de AB y los tipos de mecanismos de RAM bacterianos establecidos para contrarrestar los fármacos.

Ya se conoce el mecanismo de acción de muchos genes AMR o vías celulares. En algunos casos en los que la relación genotipo-fenotipo es sencilla, la predicción basada en genes se ha introducido en la práctica clínica en forma de pruebas moleculares rápidas. Un ejemplo es la detección del gen mecA en Staphylococcus aureus para determinar si es S. aureus resistente a la meticilina (MRSA) y  por lo tanto, requiere la modificación de un enfoque de tratamiento antibiótico típico. 

Desafortunadamente, muchos tipos de resistencia son más complejos, ya que a menudo hay una penetrancia incompleta del ARG (penetrancia es la proporción de una población que expresa el fenotipo entre todos los que presentan un genotipo de un alelo determinadoy), por lo tanto, no es posible una asociación simple con la resistencia fenotípica, como mecA, especialmente cuando se intenta generalizar ARG en múltiples especies o al evaluar múltiples AB en una vez.......

Leer el articulo completo

(*) Una vez que esta en la pagina del articulo, pulsando el botón derecho puede acceder a su  traducción al idioma español. Este blog de bioquímica-clínica está destinado a profesionales bioquímicos y médicos; la información que contiene es de actualización y queda a criterio y responsabilidad de los mencionados profesionales, el uso que le den a la misma. Las páginas de este blog , se renuevan dentro de 5 días en forma automática. Cordiales saludos. 
Dr. Anibal E. Bagnarelli,
Bioquímico-Farmacéutico-UBA.
Ciudad de Buenos Aires, R. Argentina


jueves, 18 de marzo de 2021

761- Pruebas reflejas y reflexivas en al laboratorio clínico

Gareth C McKeeman, Sally L Hall, Danielle B Freedman. Práctica de pruebas reflejas y reflexivas en bioquímica clínica en el Reino Unido: una encuesta nacional. Annals of Clinical Biochemistry. 2020; 57(1): 77–87. Department of Clinical Biochemistry, Royal Victoria Hospital, Belfast, UK. Department of Clinical Biochemistry, Luton and Dunstable University Hospital, Luton, UK.

Resumen

Antecedentes/objetivos:  La solicitud de más más pruebas a las muestras de los pacientes, ya sea por métodos reflejos (automatizados) o de forma reflexiva (después de la revisión de los resultados), sigue siendo una función importante del laboratorio de diagnóstico. Esto puede ayudar a los médicos a interpretar los resultados y contribuir a una mayor gestión. Nuestro objetivo fué investigar cómo se realiza esto en los laboratorios de bioquímica clínica en todo el Reino Unido.

Métodos: Un cuestionario, que consta de 16 escenarios clínicos, se distribuyó a los laboratorios de bioquímica clínica en todo el Reino Unido a través de la oficina  de la Association for Clinical Biochemistry and Laboratory Medicine (ACB). La encuesta buscó examinar la opinión sobre qué pruebas se consideran reflejas y reflexivas, qué miembros del personal están involucrados en la solicitud de pruebas adicionales, si se contactan a los médicos y cómo se manejan los resultados anormales.

Resultados: Se recibieron respuestas de 74 laboratorios y se recopilaron datos para cada escenario encuestado. La mayoría de los laboratorios están agregando calcio y magnesio, de manera reflexiva, para confirmar la hiperpotasemia o hipocalcemia, y también se realizan comúnmente una serie de pruebas endocrinas adicionales en escenarios particulares. Sin embargo, existen variaciones en lo que se considera pruebas reflejas y reflexivas, en cómo se realizan estas pruebas dentro del laboratorio y en el nivel de comunicación con el médico solicitante.

Discusión: Presentamos los puntos de vista de consenso de los participantes de la encuesta para una serie de pruebas adicionales de uso común dentro de la bioquímica clínica y una discusión sobre la práctica actual de pruebas reflejas y reflexivas basada en los resultados y la evidencia de la encuesta, cuando existen. Es necesario la armonización y orientación nacional en esta área.

Introducción

El laboratorio clínico, se ha centrado cada vez más en el control de los aspectos preanalíticos y analíticos de la prestación del servicio, especialmente desde la introducción de las normas ISO15189, y ha habido un impulso para mostrar mejoras continuas en estas áreas. Sin embargo, un área clave en la que los laboratorios pueden proporcionar más "valor agregado" es en la fase postanalítica, donde los profesionales del laboratorio realizan pruebas adicionales. Esto se considera una función importante del laboratorio de diagnóstico para ayudar con la interpretación de los resultados de un paciente para ayudar al diagnóstico, y el manejo o investigaciones adicionales. Sin embargo, a pesar de la importancia de este rol, es un área que no está bien establecida o definida, donde la práctica se basa en juicios individuales, lo que resulta en variaciones significativas en la práctica.

Se emplean dos métodos principales para la adición de pruebas adicionales a una muestra en los laboratorios de bioquímica clínica. Los avances recientes en los sistemas de información de laboratorio y el análisis automatizado han permitido desarrollar reglas y algoritmos para agregar pruebas automáticamente si se cumplen una serie de condiciones. Estas pruebas "reflejas" son habituales, en las que se utilizan reglas automatizadas para ayudar a identificar los resultados críticos, lo que agiliza la presencia de lo resultados.  En cambio las prueba "reflexivas" son un procedimiento en el que el especialista de laboratorio agrega pruebas adicionales. Este es un proceso más complejo que incorpora el juicio clínico y la revisión de resultados anteriores, si están disponibles. Estudios previos en esta área han demostrado que los médicos solicitantes parecen estar a favor del concepto de prueba reflexiva. Sin embargo, se señaló que era probable que hubiera variaciones interindividuales en la forma en que se realizaban.

Aunque no fue el enfoque principal de esta encuesta, las pruebas reflexivas también se asocian a menudo con la adición de comentarios interpretativos por parte del personal superior del laboratorio, que brindan orientación sobre la interpretación de los resultados al médico solicitante. 

Anteriormente, se ha señalado que hay poca información sobre la gama de pruebas reflexivas en diferentes laboratorios y que falta asesoramiento formal al respecto. La Association for Clinical Biochemistry and Laboratory Medicine publicó pautas de mejores prácticas para proporcionar comentarios interpretativos sobre informes de laboratorio clínico en 2014,  que detallaron pautas para la estandarización de comentarios interpretativos y proporcionaron algunas pautas sobre los problemas éticos que rodean las pruebas reflexivas. Ciertamente, tanto los pacientes como los colegas clínicos solicitantes parecen estar muy cómodos con el concepto de que las pruebas se agreguen espontáneamente. Sin embargo, si la prueba reflexiva puede llevar a la identificación de una enfermedad que el solicitante no consideró originalmente o que no está relacionada con la prueba inicial, entonces se debe buscar el consentimiento del paciente, generalmente a través del médico solicitante........

Leer el articulo completo

(*) Una vez que esta en la pagina del articulo, pulsando el botón derecho puede acceder a su  traducción al idioma español. Este blog de bioquímica-clínica está destinado a profesionales bioquímicos y médicos; la información que contiene es de actualización y queda a criterio y responsabilidad de los mencionados profesionales, el uso que le den a la misma. Las páginas de este blog  se renuevan dentro de 3 días en forma automática. Cordiales saludos. 
Dr. Anibal E. Bagnarelli,
Bioquímico-Farmacéutico-UBA.
Ciudad de Buenos Aires, R. Argentina



lunes, 15 de marzo de 2021

760- Auto-Evaluación - Capitulo 1

Q/A Seminario AACC-2015: Práctica profesional en bioquímica clínica: apoyo a la atención del paciente desde la cuna hasta la tumba

a) Las Preguntas que se presentan, son de acuerdo al interés vigente en nuestro medio y se editaran en varias capítulos. b) Las Respuestas que figuran al final de la presentación, son las que menciona el articulo original.

a) Preguntas

Endocrinologia reproductiva

1- ¿Qué hormona es capaz de producir efectos de retroalimentación negativos y positivos en la glándula pituitaria durante el ciclo menstrual normal? A) estradiol. B) progesterona. C) inhibina A. D) Inhibina B.

2- Qué hormona NO es secretada por el cuerpo lúteo. A) estradiol. B) progesterona. C) inhibina A. D) Inhibina B      .

3- Los niveles de gonadotropina coriónica humana deben aumentar aproximadamente un ___% cada 24-48 horas en un embarazo en el primer trimestre. A) 25%. B) 50%. C) 75%. D) 100%.

Screening pre-natal

4- Un punto de corte común utilizado para determinar mujeres con alto riesgo con un defecto del tubo neural abierto del feto es un alfa feto proteina (AFP) con un MoM (multiplos de la mediana) mayor que ___: A) 0,5. B) 1,0. C) 1,5. D) 2,0.

5- Resulltados de una prueba en suero con el mejor rendimiento para la detección del síndrome de Down es: A) estar integrado con ultrasonido y cuatro marcadores. B) Los resultados en En el primer trimestre. C) QUAD (examen cuadruple de marcadores). D) AFP.

6-¿En qué grupo étnico es MENOS efectivo el cribado prenatal de fibrosis quística?:  A) Caucásico. B) Hispano. C) Afroamericano. D) Asiático.

Complicaciones en el embarazo

7- Cuando la hCG excede la zona discriminatoria y el  ultrasonido transvaginal (TVUS) no visualiza ningún embarazo intrauterino (IUP):  A) Es un embarazo ectópico. B) Puede haber un embarazo molar. C) La prueba de hCG debe repetirse en 48 horas. D) Se deben realizar pruebas de hCG en orina para confirmar el embarazo.

8- El uso de la prueba de glucemia 75 g-2h (OGTT) aumenta la prevalencia de DMG porque: A) Requiere un único resultado de glucosa por encima de un límite para que la prueba se considere anormal. B) El carbohidrato oral es maltosa, que es el doble del contenido de glucosa de la OGTT de 100 g-3 h. C) Más mujeres se someten a pruebas con ese protocolo: D) Los límites de glucosa para identificar DMG son bajos.

9-¿Qué resultado de laboratorio no respaldaría los criterios de diagnóstico para la preeclampsia?: A) Relación protein/creatinine: 0.40. B) Recuento de plaquetas  90,000/μL. C)  Creatinine serica 1.0 mg/dL. D) Presion sanguínea de 150/95 mmHg. 

Complicaciones del parto

10- Se denomina rotura prematura de membranas en pretérmino cuando se produce  una rotura: A) Antes de las 24 semanas de gestación. B) Entre 24 y 37 semanas de gestación. C) Más allá de las 37 semanas de gestación. D) Al inicio del trabajo de parto.

11- La prueba de fibronectina fetal es potencialmente útil para identificar a las mujeres: A) Con síntomas de trabajo de parto prematuro que probablemente darán a luz a bebés prematuros. B) Sin síntomas de trabajo de parto prematuro que es probable que dé a luz a bebés prematuros. C) Con síntomas de trabajo de parto prematuro que es poco probable que den a luz a bebés prematuros. D) Sin síntomas de trabajo de parto prematuro que es poco probable que den a luz a bebés prematuros.

12- El beneficio clínico de las pruebas de madurez pulmonar fetal se deba a: A) Su capacidad para predecir qué bebés desarrollarán SDR (sindrome distres respiratorio). B) Su alto valor predictivo positivo. C) Porque son fáciles de realizar. D) Su valor clinico es mínimo.

Screening neonatal 

13- ¿Cuál de las siguientes es una razón para incluir el estudio de errores innatos del metabolismo (IEM) en los programas de cribado neonatal ampliado (NBS)?: A) El trastorno no tiene un tratamiento eficaz. B) El trastorno se puede detectar una semana después del nacimiento. C) El costo de las pruebas y el tratamiento es mayor que el costo del trastorno no tratado. D) El trastorno tiene una prueba de detección apropiada y sensible

14- La primera prueba de detección del recién nacido: A) Fue instituido en Maine para tirosinemia. B) Fue un ensayo de inhibición del crecimiento bacteriano. C) Se desarrolló en el espectrómetro de masas en tándem. D) Fue detectado para 5 trastornos

15- Los hallazgos de laboratorio comunes en las preubas de IEM, NO incluyen: A) Hiperamonemia. B) Bajas concentraciones de transaminasas. C) Acidosis metabólica con anión gap elevado. D) Hipoglucemia

16- Las acidemias propiónicas y metilmalónicas se diferencian mediante cuál de las siguientes pruebas: A) Ácidos orgánicos por GC/MS. B) Acilcarnitinas por espectrometría de masa tandem (MS/MS). C) Aminoácidos por MS/MS. D) PCR para defectos genéticos específicos.

Bilirrubina neonatal

17- ¿Cuál de los siguientes resultados bioquimicos probablemente se observan la anemia hemolítica?: A) Lactato deshidrogenasa normal. B) Bilirrubina sérica total elevada con aumento de bilirrubina conjugada (directa). C) Bilirrubina sérica total elevada con bilirrubina conjugada normal. D) Bilirrubinas séricas totales y conjugadas normales

18- ¿Cuál es la causa más probable de una bilirrubina no conjugada de 11 mg/dL (188 μmol/L) el día 2 de vida en un recién nacido?: A) Las bacterias aún no han colonizado los intestinos. B) Las enzimas hepáticas no son completamente funcionales. C) Aumenta la bilirrubina de la madre. D) Enfermedad hemolítica del recién nacido. 

19- Un bebé con atresia biliar es más probable que tenga un nivel sérico notablemente elevado de: A) Bilirrubina conjugada. B) Bilirrubina no conjugada. C) Delta bilirrubina. D) Urobilinógeno en orina.

20- ¿Cuál de los siguientes métodos mide directamente la bilirrubina no conjugada? A) métodos que utilizan ácidos sulfanílicos diazotizados. B) Método Jendrassik-Grof. C) Métodos de HPLC. D) Imágenes de Ortho dry-slides con espectrometría de reflectancia

21- De las siguientes especies de bilirrubina, ¿cuál sería más probable que le brinde los mismos resultados sin importar el método que haya utilizado para medirla?: A) Bilirrubina conjugada. B) Bilirrubina no conjugada. C) Bilirrubina unida a albúmina. D) Bilirrubina total

Respuestas   

1-  A) estradiol. 2-  D) Inhibina B. 3-  B) 50%.  4-  D) 2,0. 5-  A) Integrado con ultrasonido y cuatro marcadores. 6-  D) Asiático. 7-  C) La prueba de hCG debe repetirse en 48 horas. 8- A) Requiere un único resultado de glucosa por encima de un límite para que la prueba se considere anormal. 9-  C)  Creatinine serica 1.0 mg/dL.10- B) Entre 24 y 37 semanas de gestación. 11- C) Con síntomas de trabajo de parto prematuro que es poco probable que den a luz a bebés prematuros. 12- D) Su valor clinico es mínimo. 13- D) El trastorno que tiene una prueba de detección apropiada y sensible. 14-B) Fue un ensayo de inhibición del crecimiento bacteriano. 15- B) Bajas concentraciones de transaminasas. 16- A) Ácidos orgánicos por GC/MS. 17- C) Bilirrubina sérica total elevada con bilirrubina conjugada normal. 18- B) Las enzimas hepáticas no son completamente funcionales. 19- A) Bilirrubina conjugada. 20- C) Métodos de HPLC. D) Ortho dry-slides con espectrometría de reflectancia. 21- D) Bilirrubina total.

Leer el articulo completo

(*) Este  blog de bioquímica-clínica está destinado a profesionales bioquímicos y médicos; la información que contiene es de actualización y queda a criterio y responsabilidad de los mencionados profesionales, el uso que le den a la misma. Las páginas de este blog , se renuevan dentro de 3 días en forma automática. Cordiales saludos. 
Dr. Anibal E. Bagnarelli,
Bioquímico-Farmacéutico-UBA.
Ciudad de Buenos Aires, R. Argentina


miércoles, 10 de marzo de 2021

759- Esclerosis multiple

Ben-Schonewille- El análisis de sangre es prometedor para predecir la progresión de la esclerosis múltiple. AACC Jun 18.2020. Source: CLN Stat  

La esclerosis múltiple (EM) es una enfermedad crónica del sistema nervioso central (SNC) caracterizada por la pérdida de la función motora y sensorial, que resulta de la inflamación mediada por el sistema inmunitario, la desmielinización y el daño axonal posterior. La EM es una de las causas más comunes de discapacidad neurológica en adultos jóvenes. En la actualidad, se han definido varias variantes de la EM (y los síndromes desmielinizantes del SNC en general) en un esfuerzo por aumentar la precisión del diagnóstico, identificar el perfil inmunopatogénico único y adaptar el tratamiento en cada paciente individual

Introducción

La evidencia emergente sugiere que la cadena ligera del neurofilamento (NfL) podría ser importante para predecir la progresión de la esclerosis múltiple (EM). Un estudio en Neurology informó que los pacientes con EM con niveles elevados de este biomarcador de proteína nerviosa tenían entre un 40% y un 70% más de probabilidades que aquellos con niveles bajos de NfL de tener síntomas que empeoran en 1 año.

"Estos resultados sugieren que los niveles elevados de estas proteínas medidos al comienzo de la enfermedad pueden ayudarnos a predecir cómo se desarrollará la enfermedad y controlar cómo está funcionando el tratamiento", dijo el autor del estudio Ali Manouchehrinia, PhD, profesor asistente en el the Karolinska Institutet’s Department of Clinical Neuroscience, Suecia, en un comunicado .

El NfL aparece en el líquido cefalorraquídeo (LCR) después de una lesión cerebral axonal en ciertos trastornos neurológicos. Según la autora principal Ingrid Skelton Kockum, profesora del mismo Departamento, los niveles de NfL en el LCR se han correlacionado con los resultados a largo plazo en la EM. “También se ha demostrado que los niveles de NfL en el LCR están relacionados con el NfL en la sangre”, sin embargo, ningún estudio ha demostrado que los niveles de NfL en sangre se asocien con una discapacidad futura para los pacientes con EM, dijo Kockum a CLN Stat .

Los investigadores buscaron investigar esta asociación, inscribiendo a 4.385 personas con EM y seleccionando al azar a 1.026 personas emparejadas por edad y sexo que no tenían EM. Para ello  midieron las concentraciones plasmáticas de NfL con el kit NF-Light Advantage de matriz de molécula única (Simoa) de alta sensibilidad y utilizaron la Escala de estado de discapacidad expandida (EDSS) para categorizar a los participantes con EM mediante niveles de NfL estratificados por edad por encima de los percentiles 80, 95 y 99 del grupo de control.

EDSS es una escala que se usa para medir la discapacidad de los pacientes con EM y monitorear los cambios a lo largo del tiempo, dijo Kockum. "Se ha utilizado ampliamente en ensayos clínicos para diferentes medicamentos nuevos para la EM y en muchos estudios de investigación", agregó. Los valores en la escala van de 0 (examen neurológico normal bien) a 10 (muerte por EM). Algunos otros valores importantes incluyen: 3 (discapacidad moderada o discapacidad leve; sin impedimento para caminar); 4 (poder caminar 500 metros sin ayuda ni descansar) y 6 (requiere una ayuda  para caminar unos 100 metros con o sin descanso).

Se siguió a los participantes durante un total de 5 años para ver si desarrollaban mayores niveles de discapacidad. Los investigadores también observaron si las personas con niveles altos de NfL desarrollaron esclerosis múltiple progresiva secundaria (SPMS). Los pacientes con EM tenían un nivel medio de NfL de 11,4 pg /ml en comparación con 7,5 pg /ml en los pacientes sin EM. En general, los investigadores determinaron que los niveles elevados de NfL en plasma se correlacionaban con puntuaciones de EDSS sostenidas de 3,0 y 4,0. Los pacientes con EM tenían entre un 40% y un 70% más de probabilidades de tener una discapacidad que empeorara durante el año siguiente y un 50% más de probabilidades de alcanzar un nivel de discapacidad moderada que afectaba las actividades diarias. 

Los resultados reflejan otras variables que podrían afectar el riesgo de peores resultados en los pacientes con EM, como la tasa de recaída y la longevidad de la enfermedad. Un total de 525 pacientes con EM (16%) alcanzaron el nivel moderado de discapacidad, y 352 pacientes (9%) alcanzaron una discapacidad significativa. Sin embargo, los investigadores no encontraron una asociación consistente entre los niveles altos de proteína y un mayor riesgo de discapacidad más significativa (EDSS 6.0) o con el riesgo de desarrollar SPMS....................

Leer el articulo completo

(*) Una vez que esta en la pagina del articulo, pulsando el botón derecho puede acceder a su  traducción al idioma español. Este blog de bioquímica-clínica está destinado a profesionales bioquímicos y médicos; la información que contiene es de actualización y queda a criterio y responsabilidad de los mencionados profesionales, el uso que le den a la misma. Las páginas de este blog , se renuevan dentro de 5 días en forma automática. Cordiales saludos. 
Dr. Anibal E. Bagnarelli,
Bioquímico-Farmacéutico-UBA.
Ciudad de Buenos Aires, R. Argentina


viernes, 5 de marzo de 2021

758- ANCA y vasculitis

Duvuru Geetha, J. Ashley Jefferson. ANCA-Associated Vasculitis: Core Curriculum 2020. AJKD, 2020: 75 (1) : 124-137. Division of Nephrology, Johns Hopkins University, Baltimore, MD-USA

Resumen

La vasculitis asociada a anticuerpos anticitoplasma de neutrófilos (Antineutrophil cytoplasmic antibody (ANCA)-associated vasculitis (AAV)) es un grupo de trastornos caracterizados por la inflamación y destrucción de vasos sanguíneos de pequeño y mediano tamaño y la presencia de ANCA circulantes. Los fenotipos de enfermedad clínica incluyen granulomatosis con poliangeítis, poliangeítis microscópica, granulomatosis eosinofílica con poliangeítis y vasculitis renal limitada. La clasificación serológica de AAV en enfermedad de proteinasa 3-ANCA y enfermedad de mieloperoxidasa-ANCA se correlaciona con varias características de la enfermedad. LA AAV tiene predilección por el riñón, con más de 75% de los pacientes con compromiso renal caracterizado por glomerulonefritis rápidamente progresiva. La causa y la patogenia del AAV son multifactoriales y están influenciadas por la genética, los factores ambientales y las respuestas del sistema inmunitario innato y adaptativo. Los ensayos controlados aleatorios en las últimas 2 décadas han refinado la terapia de AAV y transformado AAV de una enfermedad fatal a una enfermedad crónica con curso recidivante y morbilidad asociada. Este artículo en La serie Core Curriculum in Nephrology de AJKD proporciona una revisión detallada de la epidemiología, patogénesis, diagnóstico y avances en el manejo de AAV.

Clasificación de vasculitis

El sistema de clasificación más utilizado para la vasculitis sistémica es el definido en The 2012 International Chapel Hill Consensus Conference (CHCC) que estratifica las vasculitis según el tamaño del vaso. La vasculitis asociada a anticuerpos anticitoplasma de neutrófilos (AAV-ANCA) se observa principalmente en 3 enfermedades clínicas: granulomatosis con poliangeítis [GPA], poliangeítis microscópica [MPA] y GPA eosinofílica [EGPA]). Cada una de estas afecciones se asocia comúnmente con un ANCA circulante, con los principales antígenos diana identificados como proteinasa 3 (PR3) y mieloperoxidasa (MPO).

Uno de los temas controvertidos actuales en AAV es la definición de enfermedad basada en el fenotipo clínico (GPA vs MPA) porque existe una superposición significativa en las características clínicas entre estas 2 enfermedades. Se ha sugerido que AAV debe clasificarse de acuerdo con la especificidad de ANCA (enfermedad de PR3-ANCA frente a enfermedad de MPO-ANCA). Las tasas de recaída (más altas en PR3-ANCA) y los resultados clínicos (mortalidad más alta en MPO-ANCA) se asocian mejor con la especificidad de ANCA, y los estudios genéticos segregan más estrechamente con la especificidad de ANCA que con el fenotipo clínico. 

Anticuerpos ANCA

Los ANCA son autoanticuerpos dirigidos contra los antígenos citoplasmáticos expresados ​​en los gránulos primarios de los neutrófilos y los lisosomas de los monocitos. Los gránulos primarios de neutrófilos contienen una variedad de proteínas antibacterianas, que incluyen lisozima, MPO, serina proteinasas neutras (PR3, elastasa y catepsina G) e hidrolasas ácidas (catepsina B y D). Pueden desarrollarse autoanticuerpos contra cualquiera de estas proteínas, pero los anticuerpos clínicamente relevantes se dirigen contra MPO y PR3. Durante la etapa activa de la enfermedad, los ANCA son típicamente inmunoglobulina G (IgG), pero se describen otras clases de inmunoglobulinas (IgM e IgA).

Pruebas ANCA

Muchos laboratorios utilizan el ensayo de inmunofluorescencia indirecta (IIF) como prueba de detección de ANCA. Aunque tanto MPO como PR3 se encuentran en gránulos primarios, se observan 2 patrones principales de inmunotinción. La fijación de etanol conduce a la disolución de los gránulos primarios, y la MPO catiónica se adhiere a la membrana nuclear cargada negativamente dando un patrón perinuclear (pANCA), mientras que PR3 permanece distribuido en un patrón citoplasmático (cANCA). Cuando se identifica un resultado positivo de IIF, el antígeno diana se confirma mediante un inmunoensayo específico de antígeno (ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas). El 2017 International Consensus Statement on ANCA Testing sobre esta pruebas recomendaron las pruebas iniciales para sospecha de VAA con inmunoensayos para PR3-ANCA y MPO-ANCA, en lugar de IIF,.

ANCA y asociaciones de enfermedades

El PR3-ANCA se asocia más comúnmente con GPA (75%), mientras que MPO-ANCA se asocia más comúnmente con MPA (60%) o vasculitis renal limitada (80%). Los ANCA atípicos, que no están dirigidos contra PR3 o MPO (ensayo inmunoabsorbente ligado a enzima positivo y negativo de IFI), se pueden encontrar en una variedad de afecciones no vasculíticas (enfermedad inflamatoria intestinal, enfermedad autoinmune y malignidad). PR3-ANCA o MPO-ANCA también se pueden encontrar en infecciones crónicas (endocarditis, tuberculosis, virus de inmunodeficiencia humana [VIH], hepatitis C y bartonelosis). La presencia de anticuerpos tanto anti-MPO como anti-PR3 en el mismo paciente es muy rara y sugiere vasculitis inducida por fármacos.................

Leer el articulo completo

(*) Una vez que esta en la pagina del articulo, pulsando el botón derecho puede acceder a su  traducción al idioma español. Este blog de bioquímica-clínica está destinado a profesionales bioquímicos y médicos; la información que contiene es de actualización y queda a criterio y responsabilidad de los mencionados profesionales, el uso que le den a la misma. Las páginas de este blog , se renuevan dentro de 5 días en forma automática. Cordiales saludos. 
Dr. Anibal E. Bagnarelli,
Bioquímico-Farmacéutico-UBA.
Ciudad de Buenos Aires, R. Argentina