Mina Nikanjam Shumei Kato, Razelle Kurzrock. Biopsia líquida: tecnología actual y aplicaciones clínicas. J Hematol Oncol. 2022; 15: 131. Division of Hematology-Oncology, University of California San Diego, La Jolla USA.Medical College of Wisconsin Cancer Center, USA
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Articulo informativo sobre la tecnología de biopsia líquida y sus aplicaciones clínicas en el perfil molecular del cáncer. Esta revisión destaca las tecnologías y los avances actuales en el campo, proporcionando información valiosa para los enfoques de oncología de precisión. Menciona ademas los profesionales involucrados en su investigación.
¿Cómo se capturan y enriquecen las CTC para su análisis en aplicaciones clínicas?
Las células tumorales circulantes (CTC) se capturan y enriquecen para su análisis en aplicaciones clínicas utilizando diversos métodos que explotan las propiedades únicas de estas células. El aislamiento y el análisis de las CTC desempeñan un papel crucial en la comprensión de la heterogeneidad tumoral, la predicción de la respuesta al tratamiento y el seguimiento de la progresión de la enfermedad en pacientes con cáncer. A continuación se muestran algunas técnicas comunes para capturar y enriquecer CTC:
- Captura de células basada en biomarcadores: las CTC se pueden capturar utilizando biomarcadores específicos expresados en la superficie de estas células. Por ejemplo, el sistema CellSearch utiliza nanopartículas de ferrofluido para separar las CTC positivas para la molécula de adhesión de células epiteliales (EpCAM) de otras células sanguíneas.
- Métodos de enriquecimiento positivo: técnicas como AdnaTest utilizan perlas recubiertas de anticuerpos específicas para el tipo de cáncer para capturar CTC, seguidas de una reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en tiempo real para determinar los patrones de expresión en las células.
- Métodos de enriquecimiento negativo: los métodos de enriquecimiento negativo implican la eliminación de células sanguíneas no deseadas para enriquecer la población de CTC. Por ejemplo, la clasificación de células activadas magnéticamente (MACS) captura células con nanopartículas magnéticas unidas a anticuerpos.
- Tecnologías de enriquecimiento inmunomagnético: tecnologías como MagSweeper utilizan varillas magnéticas robóticas controladas por aliados y perlas magnéticas recubiertas de anticuerpos para aislar CTC en función de marcadores específicos.
- Dispositivos de microfluidos: plataformas como la plataforma Target Selector CTC (Biocept) utilizan canales de microfluidos y cócteles de anticuerpos para capturar CTC y evaluar varios biomarcadores a nivel de proteínas y ADN.
Estos métodos permiten la captura y el enriquecimiento eficientes de CTC a partir de muestras de sangre, lo que permite el análisis posterior de ADN, ARN y proteínas derivadas de estas células. Al estudiar las CTC, los investigadores y médicos pueden obtener información valiosa sobre la biología del tumor, la respuesta al tratamiento y la progresión de la enfermedad en pacientes con cáncer.
¿Cuáles son algunas de las técnicas claves utilizadas para aislar y analizar ctDNA/cfDNA en biopsias líquidas?
Se utilizan varias técnicas claves para aislar y analizar el ADN tumoral circulante (ctDNA) y el ADN libre de células (cfDNA) en biopsias líquidas. Estas técnicas juegan un papel crucial en la detección de alteraciones genéticas y el seguimiento de la progresión de la enfermedad en pacientes con cáncer. Éstos son algunos de los métodos :
- Reacción en cadena de la polimerasa digital en gotas (ddPCR): la ddPCR es una técnica sensible que puede detectar niveles bajos de material genómico, lo que la hace útil para identificar mutaciones raras y calcular variantes del número de copias.
- Perlas, emulsión, amplificación y magnetismo (BEAMing): BEAMing es un método que combina PCR con citometría de flujo para detectar alteraciones en niveles muy bajos (tan bajos como 0,01%) con una alta concordancia con las pruebas de tejidos.
- Secuenciación profunda de amplicones etiquetados (TAm-Seq): TAm-Seq es una técnica de secuenciación que permite la detección de mutaciones en ctDNA/cfDNA con alta sensibilidad y especificidad.
- Perfiles personalizados de cáncer mediante secuenciación profunda (CAPP-Seq): CAPP-Seq es un método de secuenciación profunda que se utiliza para crear perfiles de ctDNA/cfDNA para identificar alteraciones procesables en pacientes con cáncer.
- Secuenciación de bisulfito del genoma completo (WGBS-Seq): WGBS-Seq es una técnica que puede proporcionar información completa sobre los patrones de metilación del ADN en ctDNA/cfDNA, lo que puede ser valioso para la investigación del cáncer y la medicina personalizada.
- Secuenciación completa del exoma (WES) y secuenciación completa del genoma (WGS): WES y WGS son técnicas poderosas que permiten el análisis de todo el exoma o genoma, respectivamente, proporcionando información detallada sobre las alteraciones genéticas en ctDNA/cfDNA.
Estas técnicas permiten a investigadores y médicos analizar ctDNA/cfDNA de biopsias líquidas con alta sensibilidad y especificidad, ofreciendo información valiosa sobre la heterogeneidad del tumor, la respuesta al tratamiento y la progresión de la enfermedad en pacientes con cáncer.
¿Cuáles son algunos de los beneficios potenciales del uso de biopsias líquidas para predecir la respuesta a la terapia de bloqueo de puntos de control inmunológico y la terapia dirigida en pacientes con cáncer?
Las biopsias líquidas ofrecen varios beneficios potenciales para predecir la respuesta a la terapia de bloqueo de puntos de control inmunológico y la terapia dirigida en pacientes con cáncer. Al analizar el ADN tumoral circulante (ctDNA), las células tumorales circulantes (CTC) y otros biomarcadores en muestras de sangre, las biopsias líquidas proporcionan información valiosa que puede guiar las decisiones de tratamiento y mejorar los resultados de los pacientes. Estos son algunos de los beneficios claves:
- Evaluación temprana de la respuesta al tratamiento: las biopsias líquidas permiten la evaluación temprana de la respuesta al tratamiento de la terapia de bloqueo de puntos de control inmunológico y la terapia dirigida mediante el seguimiento de los cambios en los niveles de ctDNA y las alteraciones genéticas a lo largo del tiempo.
- Detección de mecanismos de resistencia: las biopsias líquidas pueden ayudar a identificar mecanismos de resistencia a la terapia mediante la detección de mutaciones o alteraciones emergentes en el ctDNA y las CTC, lo que permite a los médicos ajustar las estrategias de tratamiento en consecuencia.
- Selección de tratamiento personalizada: al analizar alteraciones genéticas y biomarcadores en biopsias líquidas, los médicos pueden personalizar la selección de tratamiento para pacientes con cáncer, eligiendo terapias que tienen más probabilidades de ser efectivas según el perfil molecular del paciente.
- Monitoreo de la heterogeneidad del tumor: las biopsias líquidas brindan información sobre la heterogeneidad del tumor al capturar información genética de diferentes sitios del tumor y metástasis, lo que ayuda a adaptar los enfoques de tratamiento a las características específicas del tumor.
- Herramienta de pronóstico: las biopsias líquidas pueden servir como herramienta de pronóstico al evaluar la carga tumoral, predecir la progresión de la enfermedad y evaluar la respuesta al tratamiento, lo que en última instancia guía la toma de decisiones clínicas y mejora los resultados de los pacientes.
- Predicción de la respuesta de las células CAR-T: las biopsias líquidas pueden ayudar a predecir la respuesta de la terapia de células T con receptor de antígeno quimérico (CAR) mediante el análisis de biomarcadores y alteraciones genéticas en el ctDNA y las CTC, lo que ayuda a optimizar las estrategias de tratamiento de las células CAR-T.
En general, el uso de biopsias líquidas para predecir la respuesta a la terapia de bloqueo de puntos de control inmunológico y la terapia dirigida ofrece un enfoque dinámico y no invasivo para monitorear la eficacia del tratamiento, identificar mecanismos de resistencia y personalizar estrategias de tratamiento para pacientes con cáncer.....
2) Profesionales de la salud involucrados
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Nueva presentación el 20 de Abril.
Cordiales saludos.
Dr. Anibal E. Bagnarelli,
Bioquímico-Farmacéutico,UBA.
Ciudad de Buenos Aires, R. Argentina
