jueves, 30 de septiembre de 2021

810- Brote, Epidemia, Pandemia y Endémica

Beth Daley- Editor.. The Conversation.Search. September 20, 2021. Es probable que COVID pase de una pandemia a una endémica, pero ¿qué significa eso?

La mayoría de la gente se pregunta cuándo y cómo terminará la pandemia de COVID y todavía no hay respuestas fáciles. La palabra “endémica” se menciona con regularidad, especialmente entre los líderes y expertos en salud pública cuando discuten posibles escenarios futuros. Por lo tanto, es importante definir exactamente lo que significaría que COVID fuera endémico.

Los científicos predicen que el COVID se volverá endémico con el tiempo, pero aún habrá brotes esporádicos en los que se saldrá de control. Es probable que la transición de una pandemia a una endémica se desarrolle de manera diferente en diferentes lugares del mundo.

'Brote', 'Epidemia', 'Pandemia' y 'Endémica'

Primero, recapitulemos los términos de salud pública que los australianos han estado utilizando cada vez más en sus conversaciones durante los últimos 18 meses. Estas palabras cubren el ciclo de vida de las enfermedades e incluyen "brote", "epidemia", "pandemia" y "endémica".

Un brote es un aumento en los casos de enfermedad sobre lo que normalmente se espera en un lugar pequeño y específico, generalmente durante un período corto de tiempo. Las enfermedades transmitidas por los alimentos causadas por la contaminación por Salmonella son ejemplos frecuentes de esto.

Las epidemias son esencialmente brotes sin las estrictas restricciones geográficas . El virus del Ébola que se propagó en tres países de África occidental entre 2014 y 2016 fue una epidemia.

Una pandemia es una epidemia que se propaga por muchos países y continentes de todo el mundo. Los ejemplos incluyen los causados ​​por la influenza A (H1N1) o la “gripe española” en 1918, el VIH / SIDA , el SARS-CoV-1 y el virus Zika .

Finalmente, la circulación normal de un virus en un lugar específico a lo largo del tiempo describe un virus endémico. La palabra "endémica" proviene del griego endēmos , que significa "en población". Un virus endémico es relativamente constante en una población con patrones en gran parte predecibles.

Los virus pueden circular endémicamente en regiones geográficas específicas o globalmente. El virus del río Ross circula de forma endémica en Australia y los países insulares del Pacífico, pero no se encuentra en otras regiones del mundo. Mientras tanto, los rinovirus que causan el resfriado común circulan de forma endémica por todo el mundo. Y la influenza es un virus endémico que monitoreamos por su potencial epidémico y pandémico.

¿Cuál es el camino habitual de una pandemia a una endémica?

Con el tiempo y gracias a los esfuerzos de salud pública, desde el uso de mascarillas hasta la vacunación, la pandemia podría desaparecer como lo hicieron la viruela y la poliomielitis , o podría volverse endémica gradualmente.

Los factores del huésped, el medio ambiente y el virus se combinan para explicar por qué algunos virus son endémicos mientras que otros son epidémicos. Cuando observamos el virus SARS-CoV-2 que causa COVID, vemos que está infectando a huéspedes humanos sin inmunidad previa.

En términos de medio ambiente, el virus se transmite mejor en entornos cerrados, fríos, secos, hacinados, estrechos y con poca ventilación. Cada virus tiene sus propias características, desde la velocidad de replicación del virus hasta la resistencia a los medicamentos. Las nuevas cepas de COVID se transmiten más rápidamente y causan diferentes síntomas.

Es más probable que los virus se vuelvan endémicos si se adaptan a un entorno local y/o tienen un suministro continuo de huéspedes susceptibles. Para COVID, estos serían huéspedes con inmunidad baja o nula...... 

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(*) Una vez que esta en la pagina del articulo, pulsando el botón derecho puede acceder a su  traducción al idioma español. Este blog de bioquímica-clínica está destinado a profesionales bioquímicos y médicos; la información que contiene es de actualización y queda a criterio y responsabilidad de los mencionados profesionales, el uso que le den a la misma. Las páginas de este blog , se renuevan dentro de 2 días en forma automática. Cordiales saludos. 
Dr. Anibal E. Bagnarelli,
Bioquímico-Farmacéutico-UBA.
Ciudad de Buenos Aires, R. Argentina



martes, 28 de septiembre de 2021

809- Gen CRISPR-Cas9: terapia de una nueva era ?

Heidi Ledford, Editor. El ensayo histórico CRISPR se muestra prometedor contra una enfermedad mortal. Nature News, 29 de junio de 2021

La administración de un tratamiento de edición genética directamente en el cuerpo podría ser una forma segura y eficaz de tratar una afección poco común que pone en peligro la vida.

Los resultados preliminares de un ensayo clínico histórico sugieren que la edición del gen CRISPR-Cas9 se puede implementar directamente en el cuerpo para tratar enfermedades.

El estudio es el primero en demostrar que la técnica puede ser segura y eficaz si los componentes CRISPR-Cas9, en este caso dirigidos a una proteína que se produce principalmente en el hígado, se infunden en el torrente sanguíneo. En el ensayo, seis personas con una enfermedad rara y mortal llamada amiloidosis por transtiretina recibieron un único tratamiento con la terapia de edición genética. Todos experimentaron una caída en el nivel de una proteína deformada asociada con la enfermedad. Aquellos que recibieron la mayor de las dos dosis analizadas vieron que los niveles de la proteína, llamada TTR, disminuyeron en un promedio del 87%.

El tratamiento fue desarrollado por Intellia Therapeutics de Cambridge, Massachusetts, y Regeneron de Tarrytown, Nueva York. Publicaron los resultados del ensayo en The New England Journal of Medicine 1 y los presentaron en una reunión en línea de la Peripheral Nerve Society el 26 de junio.

Los resultados anteriores de los ensayos clínicos CRISPR-Cas9 han sugerido que la técnica se puede utilizar en células que se han extraído del cuerpo. Las células se editan y luego se reinfunden en los participantes del estudio. Pero poder editar genes directamente en el cuerpo abriría la puerta al tratamiento de una gama más amplia de enfermedades.

“Es un momento importante para el campo”, dice Daniel Anderson, ingeniero biomédico del Instituto de Tecnología de Massachusetts en Cambridge. "Es una era de la medicina completamente nueva".

Tratando lo intratable

La amiloidosis por transtiretina se produce cuando las moléculas de la proteína TTR se pliegan en forma incorrecta y se agrupan, formando fibras que interfieren con la función de los órganos. La enfermedad ataca principalmente al corazón y los nervios. Una forma hereditaria de la enfermedad afecta a unas 50.000 personas en todo el mundo; más de 100 mutaciones en el gen TTR se han relacionado con la amiloidosis por transtiretina.

La afección puede causar enfermedades cardíacas, dolor y la muerte, y hasta hace poco, los médicos podían hacer poco para tratarla. "Es una enfermedad absolutamente terrible", dice Julian Gillmore, nefrólogo del Royal Free Hospital de Londres que ha tratado a personas con diversas formas de amiloidosis durante unos 25 años. "Hasta hace unos años, los veía empeorar y morir".

Pero la amiloidosis por transtiretina se ha convertido en un objetivo principal para las nuevas tecnologías médicas que tienen como objetivo desactivar los genes que causan enfermedades. Está definitivamente relacionado con la producción de una proteína en particular: detiene la producción de esa proteína y los síntomas de la enfermedad dejan de progresar y, en algunos casos, se revierten......

En 2018, la Administración de Drogas y Alimentos de EE. UU. aprobó dos medicamentos para tratar la amiloidosis por transtiretina, los cuales reducen la producción de TTR al dirigirse al ARN mensajero que lo codifica. Pero aunque estos medicamentos reducen la TTR en aproximadamente un 80% y prolongan la supervivencia, deben tomarse de forma rutinaria para mantener bajos los niveles de TTR y no siempre detienen la progresión de la enfermedad.

La mayor parte de la proteína TTR se produce en el hígado, un órgano que absorbe fácilmente los medicamentos de la sangre. Esa característica es clave: aunque CRISPR-Cas9 ha sido aclamado como una forma revolucionaria de tratar enfermedades, tiene limitaciones. La técnica requiere una enzima de corte de ADN, llamada Cas9, y un fragmento de ARN, llamado ARN-guía, para dirigirlo al lugar adecuado en el genoma. Estos deben empaquetarse de una manera que los proteja de la degradación y deben dirgirse al lugar del cuerpo donde se necesitan.

Intellia encierra moléculas de ARN que codifican el ARN guía y la proteína Cas9 en nanopartículas hechas de biomoléculas lípidicas, que pueden ser absorbidas por el hígado. El ARN guía envía Cas9 para cortar el gen TTR; los procesos de reparación del ADN de la célula reparan la ruptura, pero a menudo cometen errores que pueden desactivar el gen y detener la producción de la proteína TTR.

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Antecedentes

CRISPR, el disruptor

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Dr. Anibal E. Bagnarelli,
Bioquímico-Farmacéutico-UBA.
Ciudad de Buenos Aires, R. Argentina


sábado, 25 de septiembre de 2021

808- LC-MS/MS: una breve historia

Brian G Keevil. LC-MS/MS, los primeros 20 años: una visión personal. Annals of Clinical Biochemistry 2021;0(0):1-4. Clinical Biochemistry, Wythenshawe Hospital, Manchester University, UK.

Editorial

Las aplicaciones clínicas de LC-MS/MS han estado en servicio de rutina durante poco más de 20 años. La introducción de la ionización por electropulverización permitió por primera vez el desarrollo de métodos de detección en recién nacidos, pero no fue hasta el comienzo del nuevo milenio cuando comenzaron a surgir las aplicaciones rutinarias de los fármacos inmunosupresores y luego los esteroides. El desarrollo de métodos fue impulsado por la mayor sensibilidad y especificidad ofrecida por LC-MS/MS sobre los métodos de inmunoensayo (IA) y HPLC existentes. En comparación con la HPLC, los nuevos métodos LC-MS/MS eran más rápidos, la preparación de muestras a menudo era más sencilla y los fármacos como la ciclosporina, que no tienen cromóforos, podían medirse por primera vez utilizando métodos cromatográficos. Los fármacos inmunosupresores se siguen midiendo mediante LC-MS/MS en los centros de trasplantes más grandes y ahora se han desarrollado métodos para medir las muestras de punción digital recogidas por el paciente en casa. Esta demostrando ser una estrategia útil en la era de COVID en diversas situaciones clínicas que se realizan de forma remota.

La vitamina D se convirtió en un objetivo temprano para el análisis debido al bajo rendimiento observado en los esquemas de EQA, principalmente debido a la reactividad cruzada con los metabolitos, pero la enorme carga de trabajo se ha vuelto inmanejable para algunos departamentos y muchos han vuelto a los métodos de IA. Esto ha puesto de relieve las principales deficiencias de LC-MS/MS en comparación con los métodos de AI establecidos: falta de automatización, equipos costosos y la necesidad de personal altamente capacitado. Otros posibles objetivos analíticos para LC-MS/MS fueron las moléculas pequeñas, ya sea difíciles de medir o mal medidas por IA. 

Las hormonas esteroides eran candidatas obvias y estas se desarrollaron inicialmente como métodos de prueba únicos, pero a medida que avanzó la instrumentación LC-MS/MS, ahora existe una tendencia a avanzar hacia paneles multiesteroides y diferencias metodológicas que incluyen instrumentación y estándares internos. Por lo general, son los esteroides que se miden con poca frecuencia (como el 17OHP) los que sufren el peor rendimiento comparativo entre los laboratorios. 

Las mejoras en el rendimiento entre laboratorios están en curso y han sido impulsadas por la conciencia cada vez mayor de que se necesitan métodos robustos y completamente validados que utilicen estándares internos isotópicos de alta calidad. La producción de material de calibración disponible comercialmente en los últimos años también ha ayudado porque los laboratorios de rutina tienen dificultades para fabricar y mantener dichos calibradores, especialmente para una amplia gama de analitos. 

La calidad también está respaldada por iniciativas como el CDC-Hormone Standardisation Programme y el  Vitamin D Standarisation Certification Programme. Tener valores objetivo de LC-MS/MS asignados al material de EQA en estos esquemas permite la evaluación del sesgo a partir del resultado real, y los valores objetivo asignados a LC-MS/MS han sido adoptados desde entonces por otros esquemas de evaluación de calidad externos nacionales, por ejemplo, UKNEQAS, pero hasta ahora solo para esteroides selectos. 

Se han realizado mejoras en la formulación y el rendimiento de algunos AI para abordar cuestiones de especificidad, pero sigue habiendo preocupaciones sobre la especificidad en los métodos individuales, por ejemplo, muchos AI de estradiol funcionan mal cuando se miden en el rango de concentración baja que se encuentra en niños, hombres, posmenopáusicas mujeres y pacientes que toman inhibidores de la aromatasa. Es importante destacar que los métodos LC-MS/MS no sufren problemas de reactividad cruzada con el antagonista del receptor de estrógenos fulvestrant 8 utilizado en el tratamiento del cáncer de mama.....

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lunes, 20 de septiembre de 2021

807- Control de drogas "recreativas"

Martina Fregonese, Andrea Albino, Claudia Covino, Alessio Gili, Mauro Bacci, Alessia Nicoletti, Cristiana Gambelunghe. Control de drogas como estrategia para la reducción de daños en reuniones recreativas: evaluación de dos metodologías diferentes de análisis de drogas. Front Psychiatry. 2021; 12: 596895. Harm Reduction Services, Cooperative “Borgorete”, Perugia, Italy

Resumen

Antecedentes:  El control de drogas como parte de las estrategias de reducción del daños producido por las mismas, representa un aspecto esencial de las políticas de salud pública. Se enfoca en la identificación rápida de drogas/medicamentos que las personas pretenden usar durante eventos nocturnos, con el fin de implementar comportamientos de protección de la salud. Las técnicas de análisis químico de fármacos varían considerablemente, desde simples reactivos colorimétricos hasta métodos forenses avanzados como la cromatografía de gases/espectrometría de masas (GC/MS).

Materiales y métodos:  En 2019, se ofrecieron servicios de control de drogas en algunos eventos nocturnos en Umbría (Italia central). Ciento veinte asistentes entregaron directamente sustancias no identificadas a un profesional de reducción de daños, quien recogió unos miligramos de las sustancias en placas de cerámica y agregó una gota de reactivo colorimétrico. Se utilizaron varios reactivos para aumentar la capacidad de diagnóstico de una sustancia, que puede reaccionar con un fármaco específico o con algunos fármacos. Posteriormente, una fracción de las muestras fue analizada por GC/MS. Se evaluó la concordancia de los resultados obtenidos utilizando estas dos metodologías y los comportamientos previstos de los consumidores después de ser informados del resultado de la prueba.

Resultados:  Analizamos 120 muestras mediante prueba colorimétrica: 32 de MDMA(NE- usualmente conocida como éxtasis), 25 de ketamina, 10 de anfetamina, 11 de cocaína, 8 de heroína y 4 de LSD. Los resultados no fueron concluyentes para 29 muestras. El análisis GS/MS confirmó MDMA en 84%, ketamina en 78%, anfetamina en 91%, cocaína en 92%, heroína en 88% y LSD en 100% de las muestras. Los resultados de las muestras con resultados no concluyentes fueron los siguientes: 2 MDMA; 7 ketamina; 2 anfetamina; 2 cocaína; 2 heroína; 2 mefedrona; 6 mezclas; 1 escombros; y 5 adulterantes como componente principal. Veintiuno de los 29 participantes informaron que no tenían intención de consumir la sustancia no identificada.

Discusión: El alto porcentaje de personas que afirmaron no tener intención de consumir las drogas no identificadas indica que el control de drogas es viable como parte de las estrategias de reducción de daños por drogas. En general, los reactivos colorimétricos mostraron un buen desempeño con respecto a las muestras sin adulterar (LSD) o en cantidades mínimas, pero no identificaron mezclas de sustancias y los adulterantes presentes en ellas. Por lo tanto, se recomienda encarecidamente el uso de métodos in situ más discriminatorios, como Raman o espectrometría infrarroja.

Introducción

El consumo de drogas ilícitas es común entre los asistentes a clubes y eventos nocturnos (como bares, discotecas, fiestas y festivales de música); y estos individuos tienen un mayor riesgo de consumir drogas que la población general. Las "drogas de club" más comúnmente utilizadas (también conocidas como "drogas de fiesta" o "drogas recreativas") incluyen entactógenos como la metilen-dioxi-met-anfetamina (MDMA, éxtasis); sedantes como flunitrazepam (Rohypnol) y gamma-hidroxibutirato (GHB); estimulantes como anfetamina, cocaína y metanfetamina; y alucinógenos como ketamina y dietilamida del ácido lisérgico (LSD). 

Estos medicamentos tienen apodos que cambian con el tiempo. El uso de estos medicamentos tiende a ser muy prevalente entre los asistentes a eventos nocturnos. Las drogas de club se utilizan para aumentar el rendimiento y el disfrute de los eventos recreativos, reducir la fatiga física, aumentar las habilidades comunicativas y relacionales de los individuos y aumentar o modificar la percepción de la realidad.  Estos fármacos actúan sobre el sistema nervioso central involucrando diferentes sistemas neuromoduladores y tienen diferentes propiedades farmacológicas, efectos fisiológicos y psicológicos y posibles consecuencias.................

Varios proyectos internacionales han implementado  estrategias de reducción de daños para prevenir el consumo de drogas recreativas entre los jóvenes:  Nightlife Empowerment & Well-being Implementation Project; Drug Checking Service: Good Practice Standards; Trans European Drugs Information (TEDI) Workgroup; Factsheet on Drug Checking in Europe, 2011; European Monitoring Center for Drugs and Drug Addiction; and An Inventory of On-site Pill-Testing Interventions in the EU: Fact Files, 2001. 

Las estrategias abarcan intervenciones, programas y políticas que buscan reducir los daños sociales, económicos y relacionados con la salud del consumo de drogas para las personas, las comunidades y las sociedades. Su objetivo es garantizar una manera pragmática de abordar el consumo de drogas a través de una jerarquía de objetivos de intervención que haga hincapié en reducir los daños relacionados con la salud del consumo continuado de drogas, ofreciendo, por ejemplo, tratamiento de sustitución de opioides y programas de agujas y jeringas para prevenir la muerte por sobredosis y reducir la propagación de enfermedades infecciosas

Se ofrecen dos amplias categorías de servicios de control de drogas. Los más comunes son los reactivos de color, la espectroscopia infrarroja por transformada de Fourier, la espectroscopia ultravioleta-visible y la espectroscopia Raman. El método de control de drogas in situ más utilizado es el uso de kits de prueba de reactivos de color simples (reactivo Marquis y otros). Estas pruebas son de naturaleza puramente presuntiva, aunque pueden ser bastante precisas para identificar un compuesto y/o mezcla cuando se utiliza un procedimiento estandarizado que comprende una serie de pruebas. Además, las pruebas de reactivos de color son rápidas y relativamente económicas y, en la mayoría de los casos, no se requieren conocimientos científicos de alto nivel para realizar estas pruebas e interpretar los hallazgos. 

Los estándares de oro actuales en el análisis forense de drogas son técnicas cromatográficas como la cromatografía líquida de alta resolución o la cromatografía de gases (GC) junto con la espectrometría de masas (MS), en las que una muestra se compara con una biblioteca de referencia de sustancias conocidas que incluyen una amplia gama de adulterantes. Estas técnicas son altamente discriminatorias y cuantitativas pero no son rápidas, a diferencia de las pruebas colorimétricas; además, están asociados a un coste elevado. Adicionalmente, se requiere personal altamente calificado para su ejecución.

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miércoles, 15 de septiembre de 2021

806- Hepatitis alcoholica

Vetriselvan Subramaniyan, Srikumar Chakravarthi, Ravindran Jegasothy, Wu Yuan Seng, Neeraj Kumar Fuloria, Shivkanya Fuloria, Iswar Hazarika, Anju Dasg. Enfermedad hepática asociada al alcohol: una revisión sobre su fisiopatología, diagnóstico y farmacoterapia. Elsevier Toxicol Rep. 2021; 8: 376–385. Department of Pharmacology, Faculty of Medicine, Bioscience and Nursing, MAHSA University, Malaysia.

Resumen

Una de las cargas mundiales en la atención de la salud es la enfermedad hepática asociada al alcohol (alcohol-associated liver disease-ALD) y su  mortalidad, causada por el consumo agudo o crónico de alcohol. El consumo crónico de alcohol daña el mecanismo de defensa normal del hígado y es probable que altere el sistema de barrera intestinal y las células inmunitarias de la mucosa, lo que conduce a una disminución de la absorción de nutrientes. El tratamiento de la ALD depende del espectro de la lesión hepática que causa: hígado graso, hepatitis y cirrosis. La base de la terapia comienza con la abstinencia del alcohol. Los corticosteroides se utilizan para el tratamiento de la ALD, pero debido a su mala aceptación, la mortalidad continua y la identificación del factor alfa de necrosis tumoral como un componente integral en la patogénesis, han centrado sus esudiosa en la pentoxifilinay, que es el anticuerpo contra dicho factor para neutralizar las citocinas en el tratamiento de la hepatitis alcohólica grave. Los antioxidantes también juegan un papel importante en el tratamiento, pero hasta el día de hoy no existe una terapia universalmente aceptada disponible para ninguna etapa de la ALD. Los aspectos del tratamiento deben restaurar las funciones intestinales y requieren tratamientos basados ​​en nutrientes para regular dicha funciones y prevenir lesiones hepáticas. La acción vital de los ácidos grasos saturados controla en gran medida la barrera intestinal. En general, esta revisión se centra principalmente en el mecanismo de la disfunción metabólica inducida por el alcohol, la contribución a la patogénesis del hígado, su diagnostico, el efecto en el embarazo y la terapia dirigida a la ALD.

- Biomarcadores: ver Tabla 2

1. Introducción

El consumo crónico y excesivo de alcohol es un problema de salud global, que conduce a enfermedades clínicas y cambios patológicos que causan enfermedad hepática asociada al alcohol (ALD). Esta patologia esta asociada con la  inflamación y lesión hepática o fibrosis progresiva que produce tres clases principales, cada una de las cuales rara vez existe en forma pura. Estos incluyen: hígado graso, hepatitis alcohólica y cirrosis. El hígado graso es una característica que está presente en la mayoría de los borrachos crónicos y se asocia con la ingesta crónica de alcohol. Un porcentaje significativamente menor de consumidores de alcohol que beben en exceso progresará a la hepatitis alcohólica, que se ha demostrado que es un precursor de la cirrosis hepática. 

La enfermedad hepática grave asociada al alcohol tiene un pronóstico muy precario. La mortalidad de los pacientes con hepatitis asociada al alcohol que tienen cirrosis relacionada es superior al 65% a los 5 años. Aunque se considera que el alcohol es una hepatotoxina directa, sólo alrededor del 20% de todos los pacientes con trastorno por consumo de alcohol desarrollan posteriormente una hepatitis asociada al alcohol. 

A nivel mundial, alrededor de 150 millones de personas están infectadas con el virus de la hepatitis C (VHC) y cada año aumenta la prevalencia de la tasa de mortalidad.  La razón de esto se debe a otros factores comórbidos que incluyen el estado inmunológico, la herencia, la edad, los factores nutricionales y el género. Tanto la duración como la cantidad de ingesta de alcohol son factores de riesgo más importantes que intervienen en el desarrollo de la ALD. El patrón del tipo de bebida y el patrón de beber juegan un papel menor en la determinación del riesgo. Parece que se requieren factores de riesgo adicionales que aún no están bien definidos en el progreso de la lesión hepática más allá de la etapa de hígado graso. 

Los corticosteroides se utilizan para el tratamiento de la ALD y, recientemente, debido a los hallazgos de la vinculación del factor alfa de necrosis tumoral con la ALD, se presta más atención a sus anticuerpos. El estudio anterior sugiere que la exposición al acetaldehído de la bebida alcohólica, tiende a ofrecer los efectos tóxicos de hipotensión, taquicardia, enrojecimiento facial y vómitos. 

Además, el mayor porcentaje de consumo de alcohol exhibió efectos de neurotoxicidad y daño hepático.También se ha observado que los antioxidantes producen un efecto beneficioso en la ALD. Sin embargo, no existe una estrategia de tratamiento adecuada que pueda tratar a ningún paciente con ALD. Esto crea una brecha en la investigación. 

La presente revisión aborda la brecha en la investigación y resume las diferentes terapias farmacológicas de la ALD dando un resumen de la patogénesis y el diagnóstico

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viernes, 10 de septiembre de 2021

805- Antidoping en manchas de sangre seca

Mario Thevis. Ampliación del horizonte de enfoques analíticos antidoping utilizando manchas de sangre seca. Oxford Acad- Clin Chem, 2021; 67 (8):1041-43. Germany Center for Preventive Doping Research, Institute of Biochemistry, German Sport University Cologne, Germany.

Editorial

Los avances en la instrumentación analítica y por lo tanto en sensibilidad y precisión han sido un gran impulso para explorar nuevas vías y estrategias en varios campos, incluidas las pruebas antidoping. Los desafíos y oportunidades en el uso de gotas de sangre seca (DBS) producidas de manera mínimamente invasiva en las pruebas de drogas deportivas se han evaluado durante más de 2 décadas, pero el potencial de DBS en el control del doping se ha reconocido solo en los últimos 10 años. Este potencial fue impulsado por necesidades específicas, limitaciones de muestreo, pruebas disponibles y las opciones recientemente introducidas para la recolección de muestras, procesamiento y sistema analítico. El espectro de analitos que se  pueden determinar cualitativa y/o cuantitativamente a partir de la DBS ha crecido continuamente, al incluir analitos objetivo representativos de todas las clases de sustancias prohibidas y métodos de doping según se define en la World Anti-Doping Agency’s Prohibited List.. 

Dentro de este espectro, se encuentran los agentes estimulantes de la eritropoyesis y las prácticas de transfusión de sangre, que han presentado dos de los desafíos analíticos más complicados en las pruebas de drogas deportivas. Recientemente, se abrió aún más la puerta para detectar la transfusión de sangre autóloga, como lo muestran Cox et al en este número de Clinical Chemistry . Este método complementa los enfoques anteriores basados ​​en análisis de sangre venosa o pruebas DBS de marcadores alternativos indicativos de transfusiones de sangre o eritropoyesis estimulada.

En la actualidad, los parámetros centrales del módulo hematológico del Athlete Biological Passportson, la concentración de hemoglobina y el porcentaje de reticulocitos (RET%), son medidos en muestras de sangre venosa que se recolectan, envían y analizan mediante analizadores hematológicos automatizados, bajo condiciones altamente estandarizadas y controladas. La proteína CD71, que se ha utilizado para detectar autotransfusiones de sangre, generalmente requiere citometría de flujo. Los requisitos de muestreo y transporte, además de la vida útil limitada de las muestras de sangre, crean cargas logísticas que pueden afectar negativamente la frecuencia y/o flexibilidad de las pruebas. 

A este respecto, el informe de Cox et al. contribuye a la detección de prácticas de doping sanguíneo. Estos autores adoptaron 2 enfoques nuevos, el uso de DBS y la medición de 3 proteínas (CD71, ferroquelatasa [FECH] y coproporfirinógeno oxidasa [CPOX]), que reflejan diferentes etapas de maduración de los reticulocitos.

En resumen, la DBS con base celulosa y preparadas a partir de sangre capilar extraída con 2 dispositivos de recolección diferentes, se sometió a una secuencia de pasos de lavado para eliminar las proteínas solubles mientras conservaba las proteínas de la membrana diana. Posteriormente, se agregaron patrones internos de péptidos marcados con isótopos estables con extensiones escindibles con tripsina, y la tripsinización produjo péptidos proteotípicos de CD71, FECH, CPOX y banda 3, más los análogos marcados isotópicamente correspondientes, lo que permite la cuantificación de los compuestos diana mediante cromatografía líquida: ña espectrometría de masas en tándem de alta resolución/alta precisión-. 

El método de prueba se optimizó y se validó ampliamente, lo que demuestra la idoneidad del ensayo para el propósito con respecto a la precisión intra e interensayo, los límites de cuantificación, la eficiencia de la digestión, los efectos de la matriz y las interferencias........

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martes, 7 de septiembre de 2021

804- Como escribir un buen artículo científico

Van Savage & Pamela Yeh Van Savage. Los consejos del novelista Cormac McCarthy sobre cómo escribir un buen artículo científico. Nature career column. Sept 2019; 26: The University of California, and the Santa Fe Institute, New Mexico, USA

El ganador del premio Pulitzer comparte sus consejos para complacer a los lectores, editores y a usted mismo.

Durante las últimas dos décadas, Cormac McCarthy, cuyas diez novelas incluyen entre otras The Road , No Country for Old Men y Blood Meridian, ha proporcionado una amplia edición a numerosos miembros de la Facultad y a grados post-doctorados en el Santa Fe Institute (SFI) en Nuevo México. Ha ayudado a editar trabajos científicos de la primera física teórica femenina titular de la Harvard University  Lisa Randall, y del físico Geoffrey West, y es autor del libro de divulgación científica Scale.

Van Savage, es un biólogo teórico y ecologista, que conoció a McCarthy en 2000, y coincidieron en el SFI durante unos cuatro años mientras Savage era un estudiante de posgrado y luego del posdoctorado. Savage ha recibido valiosos consejos de edición de McCarthy en varios artículos científicos publicados durante los últimos 20 años. 

Mientras tomaba un año sabático en el SFI durante el invierno de 2018, Savage tenía animados almuerzos semanales con McCarthy. Trabajaron para condensar los consejos de McCarthy en sus puntos más esenciales para que pudiera compartirse con todos. Estos consejos se combinaron con el pensamiento de la bióloga evolutiva Pamela Yeh y son los siguientes. 

•  El consejo más importante de McCarthy es que al escribir sea sencillo mientras cuenta una historia coherente y convincente.

• Utilice el minimalismo para lograr claridad. Mientras escribe, pregúntese: ¿es posible conservar mi mensaje original sin ese signo de puntuación, esa palabra, esa oración, ese párrafo o esa sección? Elimine las palabras o comas adicionales siempre que pueda.

• Decida el tema de su artículo y dos o tres puntos que desee que todos los lectores recuerden. Este tema y estos puntos forman el hilo conductor que recorre su pieza. Las palabras, oraciones, párrafos y secciones son la costura que lo mantiene unido. Si no se necesita algo para ayudar al lector a comprender el tema principal, no lo escriba

• Limite cada párrafo en un solo mensaje. Una sola oración puede ser un párrafo. Cada párrafo debe explorar ese mensaje haciendo primero una pregunta y luego progresando a una idea y a veces, a una respuesta. 

• Mantenga las oraciones cortas, sencillas y directas. Las oraciones concisas y claras funcionan bien para las explicaciones científicas. Minimice las cláusulas, las oraciones compuestas y las palabras de transición, como "sin embargo" o "así", para que el lector pueda concentrarse en el mensaje principal.

• No ralentice al lector. Evite las notas al pie de página porque interrumpen el flujo de pensamientos y hacen que sus ojos se muevan de un lado a otro mientras sus manos pasan páginas o hacen clic en enlaces. Trate de evitar la jerga, las palabras de moda o el lenguaje demasiado técnico. Y no uses la misma palabra repetidamente, es aburrido.

• No exagere. Solo use un adjetivo si es relevante. Su artículo no es un diálogo con las posibles preguntas de los lectores, así que no se exceda en anticiparlas. No digas lo mismo de tres formas diferentes en una sola sección. No diga "aclarar" y "elaborar" a la vez. Simplemente elija uno, o corre el riesgo de que sus lectores se den por vencidos.

• No se preocupe demasiado por los lectores que quieren encontrar una manera de discutir sobre cada punto tangencial y enumerar todas las posibles calificaciones para cada declaración. Simplemente disfruta escribiendo.

• Con respecto a la gramática, el lenguaje hablado y el sentido común son generalmente mejores guías para un primer borrador que los libros de reglas. Es más importante ser entendido que formar una oración gramaticalmente perfecta.

• Las comas denotan una pausa al hablar. La frase "En contraste..." al comienzo de una oración necesita una coma para enfatizar que la oración se distingue de la anterior, no para distinguir las dos primeras palabras de la oración del resto de la oración. Diga la oración en voz alta para encontrar pausas.

• Los guiones deben enfatizar las cláusulas que considere más importantes, sin usar negrita o cursiva, y no solo para definir términos. (Los paréntesis pueden presentar cláusulas de forma más silenciosa y suave que las comas). No se apoye en el punto y coma como una muleta para unir ideas vagamente vinculadas. Esto solo fomenta la mala escritura. No seas demasiado formal. No utilice signos de exclamación para llamar la atención sobre el significado de una frase. En su lugar, podría decir "sorprendentemente" o "intrigante", pero no se exceda. Utilice estas palabras solo una o dos veces por trabajo.

• Escriba preguntas y utilice un lenguaje menos formal para romper el tono y mantener un sentimiento amistoso. Las expresiones coloquiales pueden ser buenas para esto, pero no deben estar demasiado estrechamente ligadas a una región. De manera similar, use un tono personal porque puede ayudar a involucrar al lector. El texto impersonal y pasivo no engaña a nadie haciéndole creer que estás siendo objetivo: "La Tierra es el centro de este Sistema Solar" no es más objetivo o fáctico que "Estamos en el centro de nuestro Sistema Solar".

• Elija lenguaje y ejemplos concretos. Si debe hablar de colores arbitrarios de una esfera abstracta, es más apasionante hablar de esta esfera como un globo rojo o una bola de billar azul.

• Evite colocar ecuaciones en medio de oraciones. Las matemáticas no son lo mismo que el idioma y no deberíamos fingir que lo son. Para separar las ecuaciones del texto, puede utilizar saltos de línea, espacios en blanco, secciones complementarias, notación intuitiva y explicaciones claras sobre cómo traducir de suposiciones a ecuaciones y volver a los resultados.

• Cuando crea que ha terminado, lea su trabajo en voz alta para sí mismo o para un amigo. Encuentre un buen editor en el que pueda confiar y que dedique tiempo real y reflexione sobre su trabajo. Intente hacer la vida lo más fácil posible para sus amigos editores: numero de páginas y doble espacio.

• Después de todo esto, envíe su trabajo a los editores de la revista. Trate de no pensar en el artículo hasta que los revisores y editores regresen con sus propias perspectivas. Cuando esto sucede, a menudo es útil seguir el consejo de Rudyard Kipling: "Confía en ti mismo cuando todos los hombres dudan de ti, pero ten en cuenta sus dudas también". Cambie el texto donde sea útil y donde no explique en forma cortes por qué mantiene su formulación original.

• Y no despotricar con los editores sobre la coma de Oxford, el uso correcto de "significativamente" o la elección de "eso" versus "cuál". Las revistas establecen sus propias reglas de estilo y secciones. No obtendrá excepciones.

• Por último, intente escribir la mejor versión de su trabajo, la que más le guste. No puede complacer a un lector anónimo, pero debería poder complacerse a sí mismo. Recuerda cómo leíste por primera vez los artículos que te inspiraron mientras disfrutas del proceso de escribir los tuyos.

Cuando hagas que tu escritura sea más animada y más fácil de entender, la gente querrá invertir su tiempo en leer tu trabajo. Y seamos científicos jóvenes o novelistas de fama mundial, eso es lo que todos queremos, ¿no es así?

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(*) Una vez que esta en la pagina del articulo, pulsando el botón derecho puede acceder a su  traducción al idioma español. Este blog de bioquímica-clínica está destinado a profesionales bioquímicos y médicos; la información que contiene es de actualización y queda a criterio y responsabilidad de los mencionados profesionales, el uso que le den a la misma. Las páginas de este blog , se renuevan dentro de 3 días en forma automática. Cordiales saludos. 
Dr. Anibal E. Bagnarelli,
Bioquímico-Farmacéutico-UBA.
Ciudad de Buenos Aires, R. Argentina



domingo, 5 de septiembre de 2021

803- Vacuna COVID de ADN de la India

Editor Smriti Mallapaty. La vacuna COVID de ADN de la India es una primicia mundial y vienen más.  Nature  News  article. 02 Sept 2021

La vacuna ZyCoV-D anuncia una ola de vacunas de ADN para diversas enfermedades que se están sometiendo a ensayos clínicos en todo el mundo.

India ha aprobado una nueva vacuna COVID que utiliza hebras circulares de ADN para preparar el sistema inmunológico contra el virus SARS-CoV-2. Los investigadores han acogido con satisfacción la noticia de la primera vacuna de ADN para personas que recibe aprobación en cualquier parte del mundo, y dicen que muchas otras vacunas de ADN pronto podrían estar pisándola los talones.

Se ha descubierto que ZyCoV-D, que se administra en la piel sin una inyección, tiene un 67% de protección contra el COVID-19 sintomático en ensayos clínicos, y probablemente comenzará a administrarse en India este mes. Aunque la eficacia no es particularmente alta en comparación con la de muchas otras vacunas COVID-19, el hecho de que sea una vacuna de ADN es significativo, dicen los investigadores.

Es una prueba del principio de que las vacunas de ADN funcionan y pueden ayudar a controlar la pandemia, dice Peter Richmond, inmunólogo pediátrico de la Universidad de Australia Occidental en Perth. "Este es un paso adelante realmente importante en la lucha para derrotar al COVID-19 a nivel mundial, porque demuestra que tenemos otra clase de vacunas que podemos usar".

Cerca de una docena de vacunas de ADN contra COVID-19 se encuentran en ensayos clínicos a nivel mundial, y al menos otras tantas se encuentran en etapas anteriores de desarrollo. También se están desarrollando vacunas de ADN para muchas otras enfermedades.

“Si las vacunas de ADN tienen éxito, este es realmente el futuro de la vacunología” porque son fáciles de fabricar, dice Shahid Jameel, virólogo de la Universidad de Ashoka en Sonipat, India.

Desarrollo acelerado

La urgencia de combatir el COVID-19 ha acelerado el desarrollo de vacunas que utilizan tecnología genética, como las vacunas de ADN y ARN mensajero, dice David Weiner, director del Centro de Vacunas e Inmunoterapia del Instituto Wistar en Filadelfia, Pensilvania.

Las vacunas de ARN mostraron más rápidamente una fuerte respuesta inmunitaria en los ensayos clínicos; ahora se han inyectado a cientos de millones de personas en todo el mundo. Pero las vacunas de ADN tienen una serie de beneficios, porque son fáciles de producir y los productos terminados son más estables que las vacunas de ARNm, que generalmente requieren almacenamiento a temperaturas muy bajas.

ZyCoV-D fue desarrollado por la empresa farmacéutica india Zydus Cadila, con sede en Ahmedabad. El 20 de agosto, el regulador de medicamentos de la India autorizó la vacuna para personas de 12 años o más. La cifra de eficacia del 67% provino de ensayos que involucraron a más de 28,000 participantes, que vieron 21 casos sintomáticos de COVID-19 en el grupo vacunado y 60 entre personas que recibieron un placebo.

ZyCoV-D contiene hebras circulares de ADN conocidas como plásmidos, que codifican la proteína de pico de SARS-CoV-2, junto con una secuencia promotora para activar el gen. Una vez que los plásmidos ingresan a los núcleos de las células, se convierten en ARNm, que viaja al cuerpo principal de la célula, el citoplasma, y ​​se traduce en la propia proteína espiga. Luego, el sistema inmunológico del cuerpo genera una respuesta contra la proteína y produce células inmunitarias adaptadas que pueden eliminar infecciones futuras. Los plásmidos generalmente se degradan en semanas o meses, pero la inmunidad permanece.........

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Bioquímico-Farmacéutico-UBA.
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sábado, 4 de septiembre de 2021

811- PSA como screening del cáncer de próstata

Manisha A. Jain; Amit Sapra. Cancer Prostate Screening. Treasure Island (FL): StatPearls Publishing. 2021 May 9. Maharashtra University of Health Sciences, India;  Southern Illinois University School of Medicine-USA

Introducción

El cáncer de próstata (CaP) es la quinta causa principal de muerte masculina relacionada con el cáncer en todo el mundo, con 1.276.106 casos nuevos y 358.989 muertes al año.  En los Estados Unidos, es la segunda causa principal de muertes relacionadas con el cáncer masculino, con alrededor de 165.000 casos nuevos y 29.000 muertes anuales.  Según los datos del National Cancer Institute, para un hombre estadounidense promedio, existe un riesgo del 11 por ciento de ser diagnosticado con CaP durante su vida (la incidencia aumenta con la edad) y un riesgo del 2.5% de morir a causa de él. La edad media de muerte por cáncer de próstata es de 80 años, y el 75% de las muertes específicas por cáncer de próstata ocurren en personas mayores de 75 años. El riesgo de por vida de morir de CaP también varía en diferentes grupos étnicos, y los hombres afroamericanos tienen el riesgo más alto de 4.2%. 

Al ser el cáncer que se diagnostica con más frecuencia en los hombres, surge la preocupación de los exámenes de detección; sin embargo, la mayoría de los casos son de crecimiento lento, lo que nunca se vuelve clínicamente evidente, y los datos sugieren que muchos hombres mueren por otras causas antes de que el cáncer avance, lo que hace que los exámenes de detección de rutina sean controvertidos. 

Existen diferentes recomendaciones con respecto a cuándo y a quién realizar la detección del CaP y  todas estas medidas incorporan la prueba de PSA como la principal herramienta de detección. Aparte de las diferencias sutiles, el enfoque principal de todas estas recomendaciones es ayudar al paciente a tomar una decisión informada sobre si debe o no someterse a un cribado después de que se le expliquen los beneficios y riesgos del cribado, así como teniendo en cuenta los valores y las preferencias del paciente en esta toma de decisiones. 

Recomendaciones

1) Recomendaciones del  U.S Preventive Services Task ForceEE. UU .: 

  • En los hombres de 55 a 69 años de edad, la decisión de someterse a un cribado de PSA periódico debe ser individual después de una discusión previa exhaustiva entre el médico y el paciente sobre los riesgos, beneficios y limitaciones de dicho cribado, incorporando los valores y preferencias del paciente en la toma de decisiones.
  • No recomienda la detección de PSA en hombres de 70 años o más, ya que ofrece un beneficio de supervivencia mínimo, que no supera los efectos secundarios y las morbilidades significativas del tratamiento. 

2) Recomendaciones de la Sociedad Estadounidense del Cáncer (ACS) :

  • Los hombres asintomáticos con menos de 10 años de esperanza de vida deben recibir información sobre los riesgos, beneficios e incertidumbres asociados con la detección del CaP antes de poder tomar una decisión informada con su médico. 
  • Los hombres de riesgo promedio deben recibir esta información a partir de los 50 años. 
  • Los hombres con alto riesgo (p. Ej., Aquellos con antecedentes familiares de cáncer de próstata, en particular, un familiar de primer grado diagnosticado antes de los 65 años o los hombres negros) deben recibir esta información antes de los 50 años.

3) Recomendaciones de la  American Urologic Association (AUA):

  • Recomienda no realizar pruebas de detección de PSA en hombres menores de 40 años. 
  • Recomienda no utilizar la PSA como detección de rutina en hombres de 40 a 54 años con riesgo promedio; para los menores de 55 años con alto riesgo, la decisión con respecto a la detección es individual.
  • Para los hombres de 55 a 69 años, la decisión de someterse a un cribado debe implicar sopesar el riesgo con los beneficios. Por lo tanto, en este grupo de edad, debe haber una toma de decisiones compartida teniendo en cuenta los valores y preferencias del paciente. 
  • Para los hombres que han tomado una decisión compartida con el medico y han acordado seguir adelante, el intervalo de detección de rutina debe ser cada  2 años o más para reducir los daños de la seudo-detección. 
  • Recomienda contra la detección de PSA en hombres mayores de 70 años o cualquier hombre con una esperanza de vida de menos de 10 a 15 años. 

4) Recomendaciones de la American Academy of Family Physician (AAFP):

  • Recomienda contra la detección de PSA de rutina. En los hombres de 55 a 69 años que consideren someterse a pruebas periódicas de PSA, deben participar en la toma de decisiones colaborativa con respecto a los riesgos y beneficios de la detección. 
  • Recomienda no realizar pruebas de detección del cáncer de próstata en hombres mayores de 70 años. 

5) Canadian Task Force on Preventive Health Care 

  • No recomienda hace la prueba de PSA como screening del cáncer de próstata

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lunes, 30 de agosto de 2021

802- Auto-evaluación 4

 Q/A Seminario AACC-2015: Práctica profesional en bioquímica clínica: apoyo a la atención del paciente desde la cuna hasta la tumba

a) Las Preguntas se presentan de acuerdo al interes vigente en nuestro medio. Se editaran en varias capítulos. b) Las Respuestas que figuran al final de la presentación, son las que menciona el articulo original.

Capítulo  4

Virus

1- ¿El CDC/APHL recomienda que un inmunoensayo reactivo de cuarta generación sea seguido por una prueba con alguna  de las siguientes pruebas? A) VIH-1 / VIH-2 ab B) ARN del VIH-1.C) Western Blot. D) ARN del VIH-2.

2¿Cuál de los siguientes antígenos del VIH se detecta mediante ensayos combinados de anticuerpos / antígenos? A) p24. B) p55. C) gp120. D) gp160

3 ¿El uso del nuevo algoritmo de prueba del VIH de los CDC/APHL mejora la detección del VIH agudo?. A) Verdadero. B. Falso

4- ¿Cuál de las siguientes pruebas es reactiva durante el período ventana de la infección por VIH?. A) ARN cualitativo del VIH-1. B) IA de cuarta generación. C) Ambos de los anteriores. D) Ninguna de las anteriores

5-- ¿Qué prueba de laboratorio debe usarse para identificar la infección por VIH en bebés nacidos de madres VIH(+)?: A) Prueba de anticuerpos del VIH-1/2 de tercera generación. B) Prueba combinada del VIH-1/2 de cuarta generación. C) Prueba de ADN del VIH. D) Western blot del VIH

6- Todas las muestras positivas de HBsAg deben confirmarse mediante un ensayo de neutralización de anticuerpos: A) Verdadero. B) Falso

7- ¿Cuál de los siguientes marcadores serológicos del VHB refleja la inmunidad mediante la vacunación? A) Solo anti-HBc positivo. B) Solo IgM anti-HBc positivo. C) Solo anti-HBs positivos. D) Solo anti-HBe positivo

8- Los siguientes grupos deben someterse a pruebas de detección del VHB, excepto: A) Usuarios de drogas intravenosas. B) Mujeres embarazadas. C) HSH. D) Todos los recién nacidos.

9- La prueba de HBsAg falso negativo puede resultar de todas las siguientes condiciones excepto. A) Escape de mutantes de HBsAg. B) Infección oculta por VHB. C) Pruebas durante el período de ventana. D) VHB crónico

10- ¿Los resultados positivos de la prueba de anticuerpos contra el VHC deben confirmarse mediante que pruebas?. A) RIBA. B) ARN del VHC cualitativo. C) Western Blot. D) ARN cuantitativo del VHC

11- ¿Cuál de los siguientes genotipos del VHC es más común en América del Norte? A) Genotipo 1. B) Genotipo 2. C) Genotipo 3. D) Genotipo 6-

Monitoreo de drogas

12- El etanol se distribuye en el liquido corporal total (aproximadamente 40 L), si el límite legal de intoxicación es de 1 mg/ml en plasma, ¿cuánto etanol puro se debe consumir para alcanzar los niveles de intoxicación?. A) 400 mg. B) 40 g. C) 4g. D) 40 ml

13- La warfarina (anticoagulante) se une a proteínas en aproximadamente un 98%. Para una dosis de 5 mg, solo 0,1 mg de warfarina son gratis. Si un paciente toma una dosis normal de aspirina al mismo tiempo que warfarina (ocupa el 50% de los sitios de unión), ¿cuál es el nuevo nivel de warfarina libre en el cuerpo?. A) 0,1 mg. B) 0,2 mg. C) 0,4 mg D) 2,5 mg

14- Una mujer de 55 kg tiene una concentración plasmática de teofilina (Vd = 0,5 L / kg) de 15 μg / L. ¿Cuánta teofilina tiene en su cuerpo?. A) 200 μg. B) 300 μg. C) 400 μg. D) 500 μg

15- Un paciente tiene un nivel de digoxina potencialmente tóxico de 4.5 μg / L. Dado que la vida media de la digoxina en este paciente es de 60 horas, y suponiendo que la función renal sea estable, ¿cuánto tiempo se debe suspender el fármaco para permitir que el nivel caiga a 1,5 μg / L?. A) 1 día. B) 2 días. C) 3 días. D) 4 días

16- Un médico ordena que un bebé de 7 kg tome 200 mg de Rocephin cada 8 horas. La etiqueta del medicamento muestra que 75 - 150 mg / kg por día es el rango de dosis apropiado. ¿Cuál es la respuesta más adecuada?. A) La dosis es menor que la dosis mínima deseada. B) La dosis está dentro del rango de dosis apropiado. C) La dosis es más alta que la dosis mínima deseada. D) El rango no se puede calcular a partir de la información proporcionada.

17-Se ordena administrar fenobarbital 180 mg / m2 / 24 horas cada 8 horas para un niño cuyo BSA (área de superficie corporal es 0.29 m2. Si esta formulación de fenobarbital tiene solo un 50% de biodisponibilidad, ¿cuánto se debe administrar en cada dosis?. A) 15 mg. B) 17 mg. C) 35 mg. D) 50 mg

Respuestas según el articulo original   

1- A) VIH-1/VIH-2ab,  2- A) p24.  3- A) Verdadero. 4- D) Ninguna de las anteriores. 5- C) Prueba de ADN del VIH. 6- B) Falso. 7- C) Solo anti-HBs positivos. 8- D) Todos los recién nacidos. 9- D) VHB crónico. 10-B) ARN del VHC cualitativo. 11-A) Genotipo 1. 12- B) 40 g. 13- B) 0,2 mg. 14- C) 400 μg 15- D) 4 días. 16- B) La dosis está dentro del rango de dosis apropiado. 17-C) 35 mg. 

(*) Este blog de bioquímica-clínica está destinado a profesionales bioquímicos y médicos; la información que contiene es de actualización y queda a criterio y responsabilidad de los mencionados profesionales, el uso que le den a la misma. Las páginas de este blog , se renuevan dentro de 4 días en forma automática. Cordiales saludos. 
Dr. Anibal E. Bagnarelli,
Bioquímico-Farmacéutico-UBA.
Ciudad de Buenos Aires, R. Argentina



miércoles, 25 de agosto de 2021

801- Calcio: Intervalo de referencia ajustado por albumina

Marian Schini, Fadil M. Hannan, Jennifer S. Walsh, Richard Eastell. Intervalo de referencia para el calcio ajustado a la albúmina basado en una gran población del Reino Unido. Clinical Endocrinology 2021;194 (1): 34-39. Department of Oncology and Metabolism, University of Sheffield, Sheffield, UK

Resumen

Contexto:  El hiperparatiroidismo primario es una condición común y lleva a hipercalcemia, especialmente en mujeres mayores. Por lo tanto, es fundamental obtener una estimación sólida del límite superior del intervalo de referencia para el calcio sérico ajustado a la albúmina en la población general. El intervalo de referencia actual en uso en el Reino Unido (rango de Pathology Harmony, 2,20 a 2,60 mmol / L) se basó en una norma de consenso.

Objetivos: Establecer un intervalo de referencia para el calcio sérico ajustado a la albúmina en hombres y mujeres.

Diseño: Estudio transversal de hombres y mujeres que no tenían enfermedad renal crónica o deficiencia de vitamina D; los valores atípicos se identificaron estadísticamente  luego se acotaron y se calculó un intervalo de referencia del 99%.

Pacientes: 502.524 hombres y mujeres de 40 a 69 años del UK Biobank Study.

Mediciones: Calcio total sérico, albúmina, 25-hidroxivitamina D, y función glomerular estimada (eGFR).

Resultados: Desarrollamos una ecuación para el calcio sérico ajustado a la albúmina y la aplicamos a 178.377 hombres y mujeres que no tenían enfermedad renal crónica o deficiencia de vitamina D. Identificamos 2.962 (1,7%) como valores atípicos y, cuando se excluyen, informamos un intervalo de referencia del 99% de 2,19 a 2,56 mmol/L (8,76 a 10,24 mg/dL). Encontramos que para mujeres mayores (55-69 años) y mujeres más jóvenes (40-55 años) los límites superiores fueron 2.59 mmol / L y 2.57 mmol / L y  para todos los hombres, el límite superior fue 2.55 mmol/L.

Conclusiones:  Hemos establecido un límite superior del rango de referencia para mujeres mayores que identificaría todos los valores atípicos altos (2,60 mmol/L y más). El límite superior para las mujeres jóvenes y para los hombres es más bajo, 2,57 y 2,55 mmol/L respectivamente. El intervalo de referencia actual en uso debe actualizarse y mejorarse en función de estos hallazgos. Estos límites superiores pueden resultar útiles para identificar trastornos hipercalcémicos como el hiperparatiroidismo primario en la práctica clínica.

1. Introducción

Un intervalo de referencia es un concepto importante en la práctica clínica diaria, ya que proporciona un rango de valores para los cuales una medición se considera fisiológica en sujetos sanos. Los valores por encima o por debajo de este intervalo de referencia sugieren la existencia de una enfermedad. En el caso del metabolismo del calcio, es importante identificar los límites superior e inferior del intervalo de referencia para el calcio sérico para diagnosticar a los pacientes con trastornos de la homeostasis del calcio como el hiperparatiroidismo primario (HPTP). Esto requiere una población muy grande de personas que tengan vitamina D bien caracterizada y una estimación de la tasa de filtración glomerular (eGFR). En el Reino Unido, el rango de referencia de Pathology Harmony se ha utilizado para el calcio ajustado desde 2011; el rango informado es de 2,20 a 2,60 mmol/L. 

Además, es fundamental tener en cuenta que el calcio total puede variar significativamente según la concentración de proteínas, ya que aproximadamente el cuarenta y cinco por ciento se une a proteínas, principalmente a la albúmina. La guía NICE aconseja el uso de calcio ajustado a la albúmina al evaluar a los pacientes con alteraciones relacionados con el calcio. 

Ajustar el calcio total por la concentración de albúmina es un medio práctico para determinar el calcio sérico.  Hay varias ecuaciones disponibles en la literatura, siendo las más utilizadas las siguientes:  

calcio ajustado (mmol/L) = calcio total + [0.02 (40 − albúmina en g / L)].  

Sin embargo, sería mejor utilizar una ecuación de regresión derivada, ya que se basa en la población local de pacientes. El UK Biobank es un gran recurso sanitario que tiene como objetivo mejorar la prevención, el diagnóstico y el tratamiento de una amplia gama de enfermedades graves. Tiene datos sobre medio millón de participantes de entre 40 y 69 años, igualmente representados de ambos sexos. Con información sobre un total de treinta y cuatro biomarcadores (sangre y orina), UK Biobank es un excelente recurso para la investigación.

Los objetivos de este estudio eran calcular un intervalo de referencia para el calcio basado en la cohorte de población del Biobanco del Reino Unido y proporcionar una ecuación que pudiera ser utilizada por los científicos que estudian el metabolismo del calcio utilizando datos de dicho Biobanco.

Consideramos dos enfoques. En el primero, hemos aplicado un enfoque de identificación de valores atípicos a un estudio poblacional para identificar el rango de resultados anormales; el resultado menos anormal nos proporcionaría nuestra estimación de límite superior e inferior. Esperaríamos encontrar una prevalencia de hipercalcemia de alrededor del 1% en general, con valores más altos en mujeres mayores. 

El hiperparatiroidismo primario es una anomalía distinta de la homeostasis del calcio que comúnmente se debe a un adenoma paratiroideo. El hipoparatiroidismo es mucho menos común que el hiperparatiroidismo primario, por lo que esperaríamos menos casos. En el segundo enfoque, excluimos todos los valores atípicos identificados mediante el primer enfoque y luego usamos un enfoque sólido para calcular el intervalo de referencia del 99%. Elegimos el 99% ya que esperaríamos menos del 1% de individuos enfermos en las colas de la distribución después de excluir los valores atípicos. Esto también nos proporcionaría nuestras estimaciones de límites superior e inferior......


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viernes, 20 de agosto de 2021

800- Alteraciones del equilibrio ácido-base

Julian L. Seiftera,Hsin-Yun Chang. Trastornos del equilibrio ácido-base: nuevas perspectivas. Kidney Dis (Basel). 2017; 2(4):170–186. Renal Division, Department of Medicine, Brigham and Women's Hospital, Harvard Medical School, Boston, MA, USA

Resumen

Los trastornos acido-básicos implican la interacción compleja de muchos sistemas de órganos, incluidos el cerebro, los pulmones, los riñones y el hígado. Mientras que las limitaciones de las compensaciones son más evidentes para la mayoría de los trastornos sistémicos, las compensaciones de las alteraciones ácido-base dentro del cerebro son más complejas. Sin embargo, algunas de las limitaciones de las compensaciones son necesarias para la supervivencia, ya que la preservación de la oxigenación, el equilibrio energético, la cognición, los electrolitos y el equilibrio hídrico están conectados de forma mecánica.  Esta revisión tiene como objetivo brindar una perspectiva nueva y completa sobre la comprensión del equilibrio ácido-base y la identificación de trastornos asociados. Todos los trastornos metabólicos ácido-base pueden abordarse en el contexto de las pérdidas o ganancias relativas de electrolisis o un cambio en la brecha aniónica en los fluidos corporales. El equilibrio ácido-base y electrolítico están conectados no solo a nivel celular sino también en la práctica clínica diaria. La química de la orina es esencial para comprender la excreción de electrólitos y las compensaciones renales.  Muchas modelos son útiles para comprender el ácido-base, pero estos no son mutuamente excluyentes. La electroneutralidad y la estrecha interconexión entre el equilibrio electrolítico y ácido-base son conceptos importantes para aplicar en los diagnósticos ácido-base. Todos los modelos tienen complejidad y atajos que pueden ayudar en la práctica. No hay razón para descartar ninguno de los conceptos actuales, y hay beneficios en un enfoque combinado.

Introducción

La concentración de iones de hidrógeno de los fluidos corporales se mantiene dentro de un rango estrecho con el fin de regular los procesos metabólicos y enzimáticos normales y funciones críticas como la fertilización, el crecimiento, la regulación del volumen celular y la síntesis de proteínas. Dado que el [H+] está en concentraciones nanomolares, en comparación con el bicarbonato en cantidades milimolares, está claro que el [H+] está involucrado en muchas reacciones. El hidrógeno está en equilibrio con el agua que existe en una concentración de 55,5 M; con dióxido de carbono, un gas exhalado por los pulmones (un sistema tampón abierto), con proteínas, ácidos débiles como el fosfato de hidrógeno, y está involucrado en muchas reacciones de reducción de oxidación y síntesis de trifosfato de adenosina (ATP). 

Es habitual expresar la acidez como log 1/[H+]. Debido a que la mayoría de las células del cuerpo son electronegativas en el espacio extracelular, el pH de equilibrio dentro de las células es menor que el del líquido externo. Aunque el pH intracelular es más ácido que el extracelular, la mayoría de las células tienen mecanismos disponibles para evitar que el pH aumente o disminuya excesivamente. Es interesante que los mismos transportadores, disponibles para todas las células para controlar su propio pH, sean utilizados por los túbulos renales para eliminar el ácido en la orina. El pH extracelular está normalmente en el rango de 7,35 a 7,45.

Una fuente de ácido en el cuerpo es la producción celular de ácido carbónico, que consiste en dióxido de carbono y agua, en cantidades equimolares; en promedio, esto equivale a aproximadamente 20 moles por día, lo que representa una media de  400 ml de agua. El dióxido de carbono se llama ácido volátil porque se elimina por ventilación alveolar. Su fuente de carbono es la oxidacion de carbohidratos, cetoácidos, grasas y aminoácidos. Otra clase de ácido celular, conocido como ácidos fijos o no volátiles, consiste en sulfatos y fosfatos del metabolismo de proteínas, fosfolípidos y ácidos nucleicos, así como de fuentes inorgánicas como las sales de cloruro. En forma cuantitativa, los ácidos fijos se producen en el  orden de 1 mEq de hidrógeno por kg de peso corporal por día. Aunque estos ácidos son comparativamente pequeños en cantidad, la excreción debe realizarse en un medio acuoso, principalmente orina y debe haber tampones en la orina para recoger el hidrógeno. .......

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domingo, 15 de agosto de 2021

799- Gammapatía monoclonal de importancia clínica

Angela Dispenzieri. Gammapatías monoclonales de importancia clínica. Hematology Am Soc Hematol Educ Program. 2020; 1: 380-388. Division of Hematology and Division of Clinical Chemistry, Mayo Clinic, Rochester, MN. USA.

Resumen:  “Gammapatía monoclonal de importancia clínica” (MGCS) es el término utilizado para describir las gammapatías monoclonales no malignas que causan una enfermedad importante. MGCS es el diagnóstico diferencial para cualquier paciente que se presente en lo que parece ser una gammapatía monoclonal de significado indeterminado, y que también experimenta otros síntomas inexplicables. En términos generales, estas afecciones se pueden dividir en síntomas y signos que se refieren a los nervios, los riñones y la piel. El primer paso para realizar estos diagnósticos es considerarlos; con una condición particular en mente, el siguiente paso es solicitar las pruebas que pueden ayudar a confirmar o descartar un diagnóstico en particular. Casi todas las afecciones renales y dermatológicas se diagnostican mediante biopsias renales y cutáneas, respectivamente. No se puede subestimar la importancia de un patólogo renal y un dermatopatólogo altamente competentes. La biopsia es menos específica para las condiciones neuropáticas. Debido a que varios de los MGCS son síndromes, el reconocimiento de otras manifestaciones también es clave. Las recomendaciones de tratamiento para muchas de estas afecciones son anecdóticas debido a su rareza, pero para varias de las afecciones, la inmunoglobulina intravenosa, el rituximab y la terapia dirigida a células plasmáticas son las mejores opciones de tratamiento.

Objetivos de aprendizaje: • Reconocer el diagnóstico diferencial de una gammapatía monoclonal con neuropatía periférica, anomalías cutáneas o enfermedad renal. • Diagnosticar MGCS

Caso clínico:  Aproximadamente 18 meses antes del diagnóstico y a los 67 años, un hombre comenzó a experimentar anorexia, náuseas, vómitos y pérdida de peso. A los 12 meses antes del diagnóstico, había perdido 25 kg. Se realizó una evaluación no diagnóstica extensa, que incluyó tirotropina, autoanticuerpos anticitoplasma de neutrófilos, anticuerpos antinucleares, endoscopias, estudios de vaciamiento gástrico y tomografía por emisión de positrones-tomografía computarizada. Siete meses antes del diagnóstico se encontró una gammapatía monoclonal por inmunoglobulina Aλ. Durante los meses siguientes, este paciente desarrolló neuropatía periférica sensitivomotora, debilidad muscular progresiva, sobrecarga de volumen y seudogota. Fue ingresado en nuestro hospital, donde se le hizo un diagnóstico. Además de las presentaciones anteriores, tuvo desnutrición y anasarca . Estado funcional del Eastern Cooperative Oncology Group 4.

Introducción

El término "gammapatía monoclonal de importancia clínica" (MGCS) se acuñó después de la gammapatía monoclonal de importancia renal (MGRS) cuando se hizo cada vez más evidente que se requería un término para un paciente con un clon pequeño de células B y pequeñas proteínas monoclonales que estaban causando enfermedades graves e incluso potencialmente mortales  

La gammapatía monoclonal de "significado indeterminado" (MGUS) es un nombre inapropiado para estas afecciones. Algunos pacientes con MGCS tienen una carga clonal suficiente para satisfacer la definición de mieloma múltiple latente o macroglobulinemia de Waldenstrom latente. En resumen, MGCS es una gammapatía monoclonal que presenta dos características principales: un clon subyacente inactivo y síntomas relacionados con la inmunoglobulina monoclonal o con el clon en sí por mecanismos distintos de la carga tumoral. Los MGCS se dividen mejor en diferentes sistemas que se ven afectados, los más comunes de los cuales son el riñón, el nervio y la piel, reconociendo que en algunos casos hay superposición debido a una presentación y/o curso sistémico y multiorgánico.

MGCS neurológica

Las principales consideraciones de MGCS para un paciente con neuropatía incluyen amiloidosis de cadena ligera amiloide, síndrome polirradiculoneuropatía, organomegalia, endocrinopatía, trastorno de células plasmáticas monoclonales y cambios cutáneos), crioglobulinemia, neuropatía atáxica crónica, oftalmoplejía, inmunoglobulina M paraproteína, paraproteína y aglutina fría anticuerpos disialosil y neuropatía simétrica desmielinizante adquirida distal con proteína M, anteriormente conocida como "neuropatía periférica asociada a GMSI". Las tres primeras son enfermedades con múltiples manifestaciones sistémicas, mientras que las dos últimas se encuentran principalmente en el sistema nervioso únicamente......

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(*) Una vez que esta en la pagina del articulo, pulsando el botón derecho puede acceder a su  traducción al idioma español. Este blog de bioquímica-clínica está destinado a profesionales bioquímicos y médicos; la información que contiene es de actualización y queda a criterio y responsabilidad de los mencionados profesionales, el uso que le den a la misma. Las páginas de este blog , se renuevan dentro de 5 días en forma automática. Cordiales saludos. 
Dr. Anibal E. Bagnarelli,
Bioquímico-Farmacéutico-UBA.
Ciudad de Buenos Aires, R. Argentina



martes, 10 de agosto de 2021

798- ADN en celulas urinarias

Ze Zhou, Suk Hang Cheng, y col.. Extremos irregulares del ADN libre de células urinarias: caracterización y evaluación de viabilidad en la detección del cáncer de vejiga. Oxfort Academ.Clini Chem, 2021; 67 (4): 621–630, Li Ka Shing Institute of Health Sciences, Department of Chemical Pathology, The Chinese University of Hong Kong, SAR, China

Resumen

Antecedentes: Se sabe que el ADN bicatenario en plasma tiene extremos monocatenarios, llamados extremos dentados. Los extremos irregulares del ADN plasmático son biomarcadores de estados fisiopatológicos como el embarazo y el cáncer. Se desconoce si las moléculas de ADN libre de células urinarias (ADNcf) tienen extremos irregulares.

Métodos: Los extremos irregulares de cfDNA se detectaron incorporando citosinas no metiladas durante un proceso de reparación de extremos de DNA, seguido de secuenciación con bisulfito. La incorporación de citosinas no metiladas durante la reparación de los extremos dentados redujo los niveles de metilación aparentes medidos por secuenciación de bisulfito y se utilizaron para calcular un índice de extremos dentados. Este enfoque se denomina "análisis de extremos irregulares por secuenciación".

Resultados: El índice de extremo irregular del ADNcf urinario fue más alto que el del ADN plasmático. El perfil de índice de extremos dentados del ADN plasmático mostró varios picos principales que oscilaban fuertemente a intervalos de aproximadamente 165 pb (es decir, tamaño del nucleosoma) y picos menores que oscilaban débilmente con periodicidades de aproximadamente 10 pb. Por el contrario, el perfil del índice de extremos irregulares del ADN urinario mostró picos principales con oscilación débil pero picos menores con oscilación fuerte. El índice de extremos dentados fue generalmente más alto en las regiones de ADN del enlazador nucleosómico. Los pacientes con cáncer de vejiga (n = 46) tenían un índice de ADN urinario con extremos dentados más bajos que los participantes sin cáncer de vejiga (n = 39). El área bajo la curva para diferenciar entre pacientes con y sin cáncer de vejiga fue de 0,83.

Conclusiones: Los extremos irregulares representan una propiedad del ADNcf urinario. La generación de extremos dentados podría estar relacionada con estructuras nucleosómicas, con enriquecimiento en regiones de ADN enlazador. Los extremos irregulares del ADN urinario podrían potencialmente servir como un nuevo biomarcador para la detección del cáncer de vejiga.

Introducción

Las moléculas de ADN libre en células plasmáticas (cfDNA) consisten en fragmentos de ADN. Recientemente, se ha centrado mucho interés en los patrones de fragmentación de tales moléculas de ADN. Los tamaños de los fragmentos y los extremos, por ejemplo, presentan características nucleosómicas en relación con los tejidos de origen. En comparación con el ADN plasmático, las moléculas de ADNcf en celulas urinarias presentan un perfil de tamaño diferente; por lo tanto, las moléculas de ADN urinario están mucho más fragmentadas que el ADN plasmático. La mayoría de las moléculas de ADN urinario son <100 pb, mientras que las moléculas de ADN plasmático son más largas y tienen un tamaño modal de 166 pb. Además, una serie de picos periódicos de 10 pb parece ser más prominente en el ADN urinario que en el ADN plasmático.

Se ha reconocido cada vez más que las ADN nucleasas desempeñan un papel importante en la configuración de la fragmentación del ADNc. Estudios recientes han informado que los motivos terminales de ADN plasmático están asociados con actividades de muchas nucleasas de ADN como DNASE1L3, DNASE1 y factor de fragmentación de ADN β.

Más recientemente, se ha descubierto que el ADN plasmático lleva extremos de ADN de una sola hebra, denominados extremos dentados, que están asociados con las actividades de las ADN nucleasas, especialmente DNASE1. Se ha demostrado que las moléculas fetales circulantes en el plasma materno exhiben una mayor irregularidad en comparación con el ADN del plasma de fondo, principalmente de origen hematopoyético materno. Este aumento de la irregularidad se ha observado en pacientes con carcinoma hepatocelular en comparación con aquellos sin cáncer. 

En consecuencia, los extremos dentados del ADN plasmático representan una propiedad intrínseca del ADNcf, lo que proporciona una vía para el desarrollo de biomarcadores. Sin embargo, se desconoce la existencia de extremos irregulares en otros fluidos corporales como la orina. En este estudio, investigamos si los extremos dentados podrían estar presentes en el ADN urinario y, si los hubiera, si los bordes irregulares del ADN urinario podrían usarse como biomarcador en pacientes con cáncer de vejiga........

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