Rodrigo Almeida-Paes, Andrea Reis Bernardes-Engemann, Beatriz da Silva Motta, Claudia Vera Pizzini, Marcos de Abreu Almeida, Mauro de Medeiros Muniz, Renata Alves Barcelos Dias, and Rosely Maria Zancopé-Oliveira. Alessandro C. Pasqualotto Editor. Diagnóstico inmunológico de micosis endémicas. J Fungi (Basel). 2022; 8(10): 993. Laboratório de Micologia, Instituto Nacional de Infectologia Evandro Chagas, Fundação Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, Brazil.
Resumen
Las micosis endémicas blastomicosis, coccidioidomicosis, histoplasmosis, paracoccidioidomicosis, criptococosis, esporotricosis, talaromicosis, adiaspiromicosis y emergomicosis son causadas principalmente por hongos térmicamente dimórficos geográficamente limitados (excepto la criptococosis), y su diagnóstico puede ser difícil. Los métodos de laboratorio usuales involucrados en el diagnóstico de micosis endémicas incluyen examen microscópico y cultivo de muestras biológicas; sin embargo, en los últimos años se han implementado técnicas serológicas, histopatológicas y moleculares para el diagnóstico de estas micosis, ya que la recuperación e identificación de sus agentes etiológicos requiere mucho tiempo y poca sensibilidad. En esta revisión nos enfocamos en los métodos de diagnóstico inmunológico relacionados con la detección de anticuerpos y antígenos ya que su evidencia es el diagnóstico presuntivo,
1. Introducción
Las micosis endémicas son causadas principalmente por hongos térmicamente dimórficos que presentan una distribución geográfica limitada, ocupan nichos ecológicos específicos en el medio ambiente y pueden causar enfermedades tanto primarias como oportunistas . Además, las micosis endémicas se reconocen como causas importantes de morbilidad y mortalidad, predominantemente en el VIH/SIDA y otras afecciones inmunosupresoras, incluidos los fármacos inmunosupresores.
Las micosis endémicas más frecuentes son la blastomicosis, la coccidioidomicosis, la histoplasmosis, la paracoccidioidomicosis, la criptococosis, la esporotricosis y, más recientemente, la talaromicosis, la adiaspiromicosis y la emergomicosis, consideradas micosis endémicas emergentes. En los últimos años, el número de casos de micosis endémicas ha aumentado en todo el mundo. Además, existen variaciones significativas en su geografía, presentación clínica, manifestaciones radiográficas, métodos analíticos de diagnóstico y terapéutica. Su control adecuado implica el reconocimiento de factores de riesgo (p. ej., fuentes ambientales putativas de exposición a hongos en áreas endémicas), procedimientos de diagnóstico correctos y manejo terapéutico.
El diagnóstico de micosis endémicas es difícil de lograr. Es necesaria una evaluación precisa de los datos de laboratorio para garantizar una terapia adecuada para los pacientes. Aunque las manifestaciones de las micosis endémicas están bien definidas, su diagnóstico no puede centrarse únicamente en los datos clínicos del paciente, ya que los signos y síntomas de las micosis endémicas se superponen entre sí y con otras enfermedades infecciosas.
La asociación de datos clínicos, epidemiológicos y de laboratorio típicamente diagnostica micosis endémicas. Para corroborar el diagnóstico se deben realizar pruebas de laboratorio. Las pruebas de laboratorio habituales involucradas en el diagnóstico de micosis endémicas comprenden el examen microscópico y cultivo de varios tipos de muestras biológicas. El aspecto microscópico de los agentes suele ser indicativo en el caso de micosis endémica, pero se necesita una gran experiencia de laboratorio y la sensibilidad de estos métodos es variable. El cultivo de sitios posiblemente involucrados sigue siendo el método estándar de oro de diagnóstico, a pesar del crecimiento fúngico prolongado (hasta seis semanas en algunos casos) y la necesidad de instalaciones de bioseguridad de nivel 3 para manipular algunos agentes en el laboratorio.
Actualmente, hay otras herramientas de diagnóstico disponibles para el diagnóstico de micosis endémicas para complementar el cultivo y el examen directo. Estos métodos complementarios tienen un tiempo de respuesta rápido y una eficiencia satisfactoria. Se han desarrollado diferentes técnicas inmunológicas relacionadas con la detección de anticuerpos y antígenos para ayudar en el diagnóstico de micosis endémicas (tabla 1). En estas pruebas se han utilizado varias preparaciones antigénicas, desde antígenos crudos hasta purificados, así como proteínas recombinantes y péptidos sintéticos. Sin embargo, estos últimos no se utilizan en los ensayos validados para laboratorios de micología de rutina.
Como se mencionó antes, la evidencia serológica de estas infecciones es valiosa debido a la naturaleza lenta y la baja sensibilidad de los métodos de referencia. Además de los métodos de detección de antígenos y anticuerpos, las pruebas cutáneas intradérmicas se emplearon en gran medida en el siglo pasado, pero su uso actual con fines diagnósticos en micología médica está severamente limitado, debido a la falta de antígenos estandarizados, avances en los métodos de detección de anticuerpos y antígenos y requisitos de bioseguridad para realizar las pruebas cutáneas.
Las herramientas moleculares de detección de ADN de hongos dimórficos en muestras biológicas también se están estandarizando y validando en numerosos laboratorios para simplificar el diagnóstico. Desafortunadamente, aunque son prometedoras y útiles, las herramientas de diagnóstico no relacionadas con el cultivo no son accesibles en la mayoría de los países de bajos ingresos.
2. Blastomicosis
La blastomicosis es una infección fúngica de humanos y mamíferos causada por hongos dimórficos del género Blastomyces. Sus principales agentes etiológicos incluyen Blastomyces dermatitidis, Blastomyces gilchristii y Blastomyces percursus . La blastomicosis afecta con frecuencia a personas inmunocompetentes; sin embargo, los pacientes inmunocomprometidos son más propensos a presentar una enfermedad grave .
Visualización directa de Blastomyces spp. en muestras biológicas puede proporcionar un diagnóstico rápido, lo que permite iniciar una terapia antifúngica adecuada. La visualización correcta de los elementos fúngicos a veces es difícil de lograr mediante la tinción con hematoxilina-eosina (H&E), por lo que se recomiendan las tinciones con ácido peryódico de Schiff o plata con metenamina. El examen directo con hidróxido de potasio o blanco de calcoflúor es valioso para las muestras del tracto respiratorio. En cuanto a otras micosis endémicas, el cultivo es el método de diagnóstico estándar de oro. Los cultivos de agar dextrosa Sabouraud suelen mostrar moho Blastomyces sp. en semanas a meses.
2.1. Detección de anticuerpos
La reacción de fijación del complemento se utilizó como primera prueba inmunológica para el diagnóstico de blastomicosis utilizando el antígeno derivado de la forma de levadura, pero su sensibilidad (57%) y especificidad (30%) fueron bajas. Después de la introducción de la prueba de inmunodifusión en 1973 utilizando el antígeno “A” específico de Blastomyces spp. dermatitidis en un filtrado de cultivo, cuya eficacia de la prueba mejoró. La evaluación del antígeno “A” purificado, en lugar del antígeno de levadura crudo, y su aplicación en la prueba de fijación del complemento resultó en una alta especificidad, aunque la sensibilidad fue del 62%.
Posteriormente, se evaluó el valor del antígeno “A” purificado en un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA), que reveló una sensibilidad del 92 % y una especificidad del 84 % al comparar su eficacia diagnóstica con la blastomicosis con pruebas de fijación del complemento e inmunodifusión como estándares de oro.
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Dr. Anibal E. Bagnarelli,
Bioquímico-Farmacéutico,UBA.
Ciudad de Buenos Aires, R. Argentina
