lunes, 30 de octubre de 2017

477- Simplificando reglas de control de calidad- (II)

George S. Cembrowski, Mark A. Cervinski. Editorials:  Desmitificando el control de calidad de la muestra de referencia. Clin. Chem. 2016; 62:7 907–909.  University of Alberta, Edmonton, Alberta, Canada; Geisel School of Medicine, Dartmouth-Hitchcock Medical Center, Lebanon, NH.  

Una de las preguntas más frecuentes hechas por el novel bioquímico clinico es "¿Cómo puedo establecer el control de calidad para un analizador en particular?"  Dos nuevos documentos descritos a continuación ayudarán fácilmente tanto al neófito como al profesional en ejercicio. La práctica del control de calidad en el laboratorio clínico ha ido evolucionando por etapas. Por desgracia, las prácticas de control de calidad en el laboratorio clínico hoy en día están oscurecidas por una complejidad inmerecida, que priva al profesional la intuición tangible sobre control de calidad y según las palabras de Deming, también le priva el orgullo por el esfuerzo empleado. 

En los laboratorios clínicos de los Estados Unidos, las prácticas de control de calidad son enormemente divergentes y además costosas. En una revisión reciente, Kazmierczak declaró que "los costos asociados con la realización de pruebas de control de calidad y los costos asociados con la evaluación, revisión y mantenimiento de los registros de control de calidad no son triviales".  Citó un estudio de una nación en vías de desarrollo que consideró que los costos de calidad representaban el 22% del total de los gastos directos de laboratorio; un 89% de los costos de mantenimiento de la calidad están asociados a la calibración y análisis del material de control de calidad necesario para confirmar la exactitud y fiabilidad en los resultados de las pruebas.

La simplicidad es necesaria en las prácticas de control de calidad de hoy y en el número de este mes , Yago y Alcover, bioquímicos  españoles, proporcionan un nomogramas altamente instructivos que permiten la selección de normas simples de control de calidad para producir bajas frecuencias de resultados defectuosos en las series analíticas.  Estos nomogramas sorprendentemente ordenados y listos para usar son un contraste bienvenido con los complejos conjuntos de reglas empleadas por muchos bioquímicos y elaborados con o sin la ayuda de un software de selección de control de calidad. Los nomogramas de Yago y Alcover dan el número de análisis defectuosos por corridas analíticas de  100 muestras analizadas. Estos nomogramas demuestran visualmente la importancia de seleccionar analizadores con altos sigma (σ) (superiores a  4) para mantener en un 2-3% el número de resultados informados inaceptables no detectados. 

Los autores han presentado la utilidad de los 12s, 12,5s, 13s , 13.5s y 14s para detectar errores sistemáticos. Con sigmas de ensayo por encima de 4, el regla de control 13s  utilizando 3 materiales de control de calidad, producirá solamente 1 % de muestra defectuosos. Los ensayos con sigmas mayor de 5 usando 3 concentraciones de material de control de calidad, con las reglas 13.5s y 14s marcaran entre  0-1 de  muestras defectuosas por cada 100 muestras. El uso de reglas más sensibles (es decir, 12s, 12,5s ) no sería de un beneficio adicional significativo y sólo aumentaría la probabilidad de falsos rechazos.


Nomograma de yago y Alcover


(*)  Una vez que esta en la pagina del articulo, pulsando el botón derecho puede acceder a la traducción del mismo al idioma español. Este blog de bioquímica-clínica no persigue fin de lucro alguno. Está destinado a profesionales bioquímicos y médicos; la información que contiene es de actualización y queda a criterio y responsabilidad de los mencionados profesionales, el uso que le den al mismo. Las páginas de este blog se renuevan cada 5 días en forma automática. Cordiales saludos. 
Dr. Anibal E. Bagnarelli, Bioquímico-UBA. Ciudad de Buenos Aires, Argentina





miércoles, 25 de octubre de 2017

476- Control de calidad Interno en la R. de Chile (I)

Autores:  René Gómez Lagos.  Hugo Moscoso Espinoza,  Eduardo Retamales Castelletto,  Carolina Valenzuela Barros,  Revisores Internos: Mitzy Celis Morales, Paola Pellegrini Pinto, Verónica Ramírez Muñoz, Revisores Externos:  José Díaz Garrote, Claudio Medel Polanco, Carolina Prieto Castillo ”Guía técnica para control de calidad de mediciones cuantitativas en el laboratorio clínico.” (2015) Instituto de Salud Pública, Ministerio de Salud, Republica de Chile. 

Resumen:   Estas recomendaciones corresponden a una actualización y reemplazo del documento ICPCC-03/2009 “Guía técnica normalizada de control de calidad - control de calidad interno y externo para analitos en el Laboratorio Clínico”. Han sido  elaboradas por los Laboratorios Nacional y de Referencia Inmunología, Química Clínica y Hematología del Instituto de Salud Pública y revisadas por un grupo de expertos con demostrada experiencia en el ámbito del aseguramiento de la calidad. El contenido de este documento describe una guía técnica para planificar el control de calidad, entrega definiciones y sugerencias en el uso adecuado de los datos obtenidos en el control de calidad interno y externo, además proporciona herramientas y lineamientos generales que permiten al laboratorio clínico asegurar la calidad de sus resultados como apoyo a las decisiones clínicas. 

Alcance:   Esta guía permite orientar sobre las prácticas aceptadas a nivel internacional para el aseguramiento de la calidad de los resultados analíticos de laboratorio clínicos. Entrega directrices para la elaboración de procedimientos de control de calidad, que les permitan controlar los resultados en una corrida analítica, evaluar la competencia y desempeño analítico del proceso de medición cuantitativo de acuerdo a la calidad prevista para análisis clínicos.

Introducción

El Instituto de Salud Pública de Chile ha elaborado esta guía de control de calidad interno y externo con la participación de los Laboratorios Nacionales y de Referencia de Inmunología, Hematología y Química Clínica, con la finalidad de recomendar un proceso normalizado para el control de calidad interno y externo y a través de ésta forma obtener una mejora continua y uniforme de la calidad de las prestaciones de los laboratorios clínicos del país. En esta última década, la mejora continua de las características de desempeño de los métodos analíticos, donde la diversidad de exámenes, el desarrollo tecnológico y la informática, han contribuido al enorme desarrollo del laboratorio clínico. Hoy, la disponibilidad de herramientas que permiten planear y controlar la calidad analítica de los exámenes asegura la liberación de resultados útiles para el diagnóstico clínico. 

Los primeros ensayos de evaluación de la calidad con el propósito de diseñar estrategias encaminadas a mejorar su desempeño, fueron desarrollados por Levey y Jennings (1950) quienes propusieron la adaptación de los procedimientos de control de calidad industrial empleados por Shewhart a los laboratorios clínicos, transformándose en la primera evidencia de la aplicación de cartas de control en el área del laboratorio clínico. En 1952, Henry y Segalove introducen estándares y muestras de pacientes determinadas por duplicado para la elaboración de cartas de control tipo Levey y Jennings. 

En sus inicios, los criterios de evaluación para juzgar el desempeño de los métodos incluyeron las reglas de control ±2s y ±3s, sin embargo, con el desarrollo y uso más frecuente de multianalizadores, pronto se evidenció que la regla de control ±2s aumentaba el número de eventos falsamente positivos, por lo que luego se la consideró como una regla indicativa de situaciones de “alarma” más que una regla de “control”……….

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Pagina relacionada: N° 7

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Dr. Anibal E. Bagnarelli, Bioquímico-UBA. Ciudad de Buenos Aires, Argentina

viernes, 20 de octubre de 2017

475- HIV Diagnostico y tratamiento

Zulfiqar HF, Javed A, Sumbal, Afroze B, Ali Q, Akbar K, Nadeem T, Rana MA, Nazar ZA, Nasir IA, Husnain T. Diagnóstico y tratamiento del VIH a través de tecnologías avanzadas. Front Public Health. 2017, 7; 5:32. Centre of Excellence in Molecular Biology, University of the Punjab, Lahore, and Department of Microbiology, Quaid-i-Azam University, Islamabad , Pakistan.

Resumen

El virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) es el principal factor que contribuye al costo de la salud mundial. En 2010, el VIH fue la quinta causa principal de discapacidad en personas de todas las edades, principalmente entre 30 y 44 años. Sobre la base de propiedades biológicas, morfológicas y genéticas el HIV es miembro de la familia Retroviridae del género Lentivirus. Infecta a diferentes células del sistema inmunológico, como las células T CD4+ (células T auxiliares), células dendríticas y macrófagos. El VIH tiene dos subtipos: VIH-1 y VIH-2. Entre estas cepas, el VIH-1 es el más virulento y patógeno. Los métodos avanzados de diagnóstico están explorando nuevas formas de tratamiento, contribuyendo a la reducción de los casos de VIH. Las técnicas de diagnóstico como PCR, prueba rápida, EIA, antígeno p24 y western blot han mejorado notablemente el diagnóstico de VIH. La terapia antirretroviral y las vacunas son candidatos prometedores en la provisión de regímenes terapéuticos y preventivos, respectivamente. La aparición de CRISPR/Cas9 es un avance importante en el campo del control de la enfermedad del VIH

Introducción

El virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) se origina a partir de un virus infectante de mono, o virus de inmunodeficiencia de simio (SIV), y se han descrito varias teorías a este respecto. Muchas de las características epidemiológicas, filogenéticas y genómicas del VIH son similares a las del SIV, lo que apoya firmemente la idea de transmisión de especies cruzadas. Sobre la base de propiedades biológicas, morfológicas y genéticas el HIV es miembro de la familia Retroviridae del género Lentivirus. Los casos iniciales de VIH fueron reportados al CDC en 1981  y el virus fue aislado por primera en 1983, en pacientes con inmunodeficiencia severa, más tarde denominado Síndrome de Inmunodeficiencia Adquirida (SIDA). Desde entonces, la virología del VIH y la patogénesis de la infección se estudian constantemente. Se han aislado y caracterizado dos tipos de VIH de pacientes infectados con el virus: VIH-1 y VIH-2. Entre estas cepas, el VIH-1 es el más virulento y patógeno, y cuando las personas normalmente hablan de VIH sin indicar el tipo de virus se refieren al VIH-1. Por otra parte, el VIH-2 sólo se limita a algunas zonas de África central y occidental. Una investigación detallada sobre la estructura del VIH y su mecanismo de infección no sólo ha permitido caracterizar y desarrollar vacunas y fármacos nuevos y eficaces, sino que también ha descrito nuevos enfoques para su diagnóstico en el laboratorio. 

Tropismo del VIH

El virus de inmunodeficiencia humana infecta diferentes células del sistema inmune, tales como células T CD4+ (células T auxiliares), células dendríticas y macrófagos. Sin embargo, los linfocitos T CD4+ son el principal objetivo del VIH, y después de la infección, estas células son utilizadas por el VIH como huésped para hacer copias e infectar otras células del cuerpo. Esto conduce al colapso del sistema inmunológico a medida que disminuye el número de células CD4+ en el cuerpo. Esta disminución en el número de células CD4+ indica el desarrollo del VIH al SIDA. La mayoría de los receptores de quimioquinas CCR5 y CXCR4 son usados ​​comúnmente por estos virus para lograr el ingreso en las células T auxiliares. Sin embargo, en algunas células, tales como astrocitos y células epiteliales renales, se produce una infección por VIH independiente de CD4 y la patogénesis subsiguiente depende de la expresión génica del VIH. .........

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domingo, 15 de octubre de 2017

474- WHO- Pruebas de Hepatitis B y C

WHO Directivas sobre Pruebas de Hepatitis B y C.  World Health Organization- Geneva; 2017 

Antecedentes

El virus de la hepatitis B (VHB) y la infección por el virus de la hepatitis C (VHC) son las principales causas de enfermedad hepática aguda y crónica del mundo; por ejemplo, la cirrosis y carcinoma hepatocelular causan un estimado de 1,4 millones de muertes al año. Se calcula que, en la actualidad, 248 millones de personas viven con infección crónica por el VHB y que 110 millones de personas con anticuerpos contra el VHC, de los cuales 80 millones tienen infección virosica activa. La carga de pacientes VHB y el VHC crónicos sigue siendo desproporcionadamente alta en los países de ingresos bajos y medianos , particularmente en Asia y África. Además, incluso en áreas de baja prevalencia, ciertas poblaciones tienen altos niveles de infección por VHC y HBV, como las personas que se inyectan drogas, hombres que tienen relaciones sexuales con hombres , personas con VIH,  y comunidades indígenas.

El desarrollo de regímenes de tratamiento con antivirales de acción directa oral  altamente efectivos y bien tolerados con altas tasas de curación después de 8-12 semanas de tratamiento ha revolucionado la teraputica de la infección crónica por VHC, aunque los altos precios de estos nuevos medicamentos siguen siendo  importante en muchos países. También está disponible un tratamiento antiviral eficaz a largo plazo con tenofovir o entecavir para las personas con infección crónica por el VHB. Sin embargo, a pesar de la alta carga global de enfermedad debida a la infección crónica por VHB y VHC y los avances y oportunidades de tratamiento, la mayoría de las personas infectadas con VHB y/o VHC no son conscientes de su infección e infectan a otros. 

Hay varias razones por las que se realizan un  bajo porcentaje de pruebas de hepatitis. Estos incluyen limitadas instalaciones o servicios para las pruebas de hepatitis, falta de políticas sobre el control de pruebas efectivas, carencia de directivas nacionales, complejos algoritmos de diagnóstico y la falta de capacidad de laboratorio y de sistemas de garantía de calidad.

Las pruebas y el diagnóstico de la infección por hepatitis B y C son la puerta de entrada para el acceso a los servicios de prevención y tratamiento, y es un componente crucial para una respuesta eficaz a la epidemia de hepatitis. La identificación temprana de las personas con infección crónica por VHB o VHC les permite recibir la atención y el tratamiento necesarios para prevenir o retrasar la progresión de la enfermedad hepática. Las pruebas también brindan la oportunidad de vincular a las personas con las intervenciones para reducir la transmisión, a través del asesoramiento sobre comportamientos de riesgo y el suministro de productos de prevención (como agujas y jeringas estériles) y la vacunación contra la hepatitis B.

Esta  Directiva está organizado en tres secciones distintas:

Introducción - Parte 1 : Capítulos introductorios sobre epidemiología, historia natural y ensayos de diagnóstico in vitro para la infección por el virus de la hepatitis B y C.

Recomendaciones - Parte 2 : Nueve capítulos con resumen de recomendaciones, evidencia y justificación 

Implementación - Parte 3 : Orientación para apoyar la implementación de estas recomendaciones a nivel de país que incluyen un marco para la toma de decisiones y la planificación en dos áreas clave: cómo organizar los servicios de laboratorio de pruebas de hepatitis (sistemas de selección y evaluación de ensayos y sistemas de garantía de calidad ) y cómo planificar la mejor combinación estratégica en los enfoques de las pruebas...............................

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martes, 10 de octubre de 2017

473 -Caso clínico: Hipogonadismo con testoterona normal

Ingrid Borovickova, Naomi Adelson, Ananth Viswanath, Rousseau Gama. Hipogonadismo con testosterona en suero normal. Clinical Chemistry, 2017, 63:8 1326–30.  Departments of Biochemistry and Endocrinology, New Cross Hospital, The Royal Wolverhampton NHS Trust, Wolverhampton, UK.

Descripción del caso

Un hombre de 69 años de edad fue derivado al Servicio de  Endocrinología con una historia de 3 años de disfunción eréctil, disminución de la libido y falta de tumescencia nocturna, sin respuesta a los inhibidores de la fosfodiesterasa tipo 5 (sildenafil y tadalafil). 

El paciente había pasado una pubertad normal. Aunque él no engendró ningún niño, no estaba preocupado por esto y nunca buscó investigación o tratamiento de fertilidad. Su historia clínica anterior fue clínicamente significativa para enfermedad pulmonar intersticial recientemente diagnosticada debido a una neumonitis por hipersensibilidad, osteoartritis y reflujo gastroesofágico; 

Sus únicos medicamentos fueron el gel de ibuprofeno y lansoprazole. Nunca le prescribieron esteroides, ketoconazol o espironolactona. No había sufrido radiación ionizante y había negado el uso de drogas de venta libre o recreativas. Él era un ex-fumador que bebia 8 medidas de alcohol por semana. No recordaba una historia previa de paperas o traumatismo testicular. No tenía conocimiento de ningún miembro de la familia que tuviera un trastorno autoinmune o problemas de fertilidad.

El paciente mide 178 cm de alto y era obeso [índice de masa corporal (IMC) 37,3 kg /m2]. Su relación entre el brazo y la altura era menor de 1,05 y su examen cardiovascular no reveló soplos cardíacos. Tenía un patrón de pelo normal y no tenía ginecomastia. El volumen testicular se redujo bilateralmente a 12-15 mL (intervalo de referencia mayor de 15 mL). La testosterona evaluada con el método  inmunoensayo quimioluminiscente de 1 paso (Abbott Architect, y ensayo de testosterona de segunda generación) fue de 16,0 nmol/L (intervalo de referencia 4,9-32 nmol/L); la SHBG se incrementó a 153 nmol /L (13,5-71,4 nmol/l), lo mismo que la LH) y la FSH a 33,4 UI / L (0,6-12,0 UI / L) y 54,7 UI / L (1,0-11,9 UI / L), respectivamente . 

Estos resultados, que indicaban hipogonadismo hipergonadotrópico, se confirmaron en pruebas repetidas 3 semanas más tarde. En ese momento, la testosterona también se midió por LC-MS/MS y los resultados confirmaron una testosterona total normal, excluyendo así una interferencia de inmunoensayo positivo. Valores bajos calculados de testosterona biodisponible (bioT) [2,05 nmol / L (2,29-14. 5 nmol/l)] y testosterona libre (FT) [0,106 nmol/L (0,174-0,729 nmol/L)] fueron compatibles con el hipogonadismo. Otras pruebas de sangre mostraron resultados normales para el panel metabólico rutinario, el recuento sanguíneo completo, la saturación de transferrina, el estrógeno, las pruebas tiroideas y la prolactina. Los resultados de la glucosa plasmática, el calcio ajustado, la vitamina B 12 y el cortisol matutino también fueron poco significativos, haciendo improbable una condición autoinmune................

Preguntas a considerar

¿Cuáles son los criterios para LOH?
¿Cuáles son las dificultades para medir la concentración sérica total de testosterona?
¿Cuáles son las condiciones comunes que aumentan la SHBG?
¿Qué métodos se deben utilizar para determinar FT y bioT?

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jueves, 5 de octubre de 2017

472- Alérgenos de polen: diagnóstico molecular

Isabel Pablos, Sabrina Wildner, Claudia Asam, Michael Wallner,  Gabriele Gadermaier. Alérgenos de polen: diagnóstico molecular. Springer-Curr Allergy Asthma Rep. 2016; 16: 31. Department of Molecular Biology, University of Salzburg,  Austria

Resumen

Los alérgenos de polen son una de las principales causas de alergias de tipo I que afecta hasta un 30% de la población en los países industrializados. Los cambios climáticos inciden en la duración e intensidad de las estaciones de polen y pueden, junto con la contaminación contribuir a una mayor incidencia de alergias respiratorias y el asma. Las gramíneas alergénicas, arboles  hierbas, a menudo presentan hábitats similares y períodos de floración que comprometen la anamnesis clínica. Los enfoques utilizando las molécula especificas permiten distinguir entre una sensibilización  genuina y clínicamente relevante  de una reactividad cruzada de IgE debido a por ejemplo, panalergenos o determinantes carbohidratos. Además, la sensibilidad, así como la especificidad se puede mejorar y conducir a la identificación de la fuente de sensibilización primaria que es particularmente beneficioso con respecto a los pacientes poli-sensibilizados. Esta revisión ofrece una visión general sobre los alérgenos del polen pertinentes y su utilidad en la práctica diaria. El diagnóstico apropiado de la alergia está influyendo directamente en las intervenciones terapéuticas y por lo tanto, los biomarcadores fiables son fundamentales cuando se considera la inmunoterapia con alérgenos en el contexto de la medicina de precisión.

Introducción

Las reacciones alérgicas al polen representan el tipo más frecuente de alergias que afecta hasta un 30% de la población industrializado. Se espera que los cambios climáticos puedan influir en la duración, e intensidad de las estaciones de polen que pueden de común acuerdo con la contaminación del aire contribuir a un mayor número de alergias respiratorias y el asma. 

Las nano-vesículas derivadas del polen y otros componentes pequeños (por ejemplo, la adenosina) pueden jugar un papel específico en el curso de las enfermedades alérgicas. La anamnesis clínica de alergias al polen para identificar la fuente de inducción de la enfermedad puede verse obstaculizada por hábitat similares y períodos de floración de ciertas plantas y el hecho de que los síntomas pueden ser provocados por el polen transportado por el viento lejos de su origen. 

Los pacientes son a menudo multi-sensibilizados por diversas fuentes de alergenos debido a la reactividad cruzada de IgE, la co-sensibilización, o ambos. Las pruebas cutáneas prick test y la detección de IgE específica utilizando extractos de polen crudos se llevan a cabo actualmente en el diagnóstico de alergia rutina. Sin embargo los extractos de alergeno  contienen una variedad de componentes alergénicos y no alergénicos, y la estandarización de estos extractos de polen son difíciles de distinguir debido a  preparaciones de diversos orígenes y sus productos. Además de la fuente específica para la marcación alergenica de modo especifico, hay alergenos menores incluyendo pan alérgenos con hidratos de carbono de reacción cruzada que están presentes en los extractos y puedan impedir la exactitud diagnostica del mismo. 

El diagnóstico molecular utilizando componentes bien caracterizados de una fuente natural o producido como moléculas recombinante (*) permite a los médicos obtener información detallada sobre los perfiles de sensibilización y, por tanto apoyar la gestión para mejoría de los pacientes.

Hay más de 150 alérgenos de polen que son reconocidos por la IUIS Allergen Nomenclature Sub-committee procedentes de césped, árboles, y semillas. Esta revisión se centra en los componentes más relevantes y disponibles en el mercado que se discutirán con detalle. También proporcionamos una visión general de diversos perfiles de reactividad cruzada de IgE dentro de las familias Ole e 1-like pectato-liasa y de la proteína no especifica de transferencia de lípidos específica (nsLTP)................. 

(*) InmunoCAP:  reactivos para diagnóstico in vitro  marca Phadia AB, comercializados en Argentina por ::
ETC Internacional SA (http://www.etcint.com.ar/)

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