Brian G Keevil. LC-MS/MS los primeros 20 años: una visión personal. SAGE. Annals of Clinical Biochemistry 2022; 59(1): 3–6. Wythenshawe Hospital, Manchester University NHS Foundation Trust, Manchester, UK.
Las aplicaciones clínicas de LC-MS/MS (Liquid chromatography-mass spectrometry) han estado en servicio rutinario durante poco más de 20 años. La introducción de la ionización por electropulverización permitió por primera vez el desarrollo de métodos de detección en recién nacidos, pero no fue hasta el comienzo del nuevo milenio cuando comenzaron a surgir las aplicaciones de rutina para los medicamentos inmunosupresores y luego los esteroides. El desarrollo del método fue impulsado por la mayor sensibilidad y especificidad que ofrece LC-MS/MS sobre los métodos de inmunoensayo (IA) y HPLC existentes. En comparación con la HPLC, los nuevos métodos de LC-MS/MS son más rápidos, la preparación de muestras a menudo era más sencilla y los fármacos como la ciclosporina, que no tienen cromóforos, podían medirse por primera vez mediante métodos cromatográficos. Los medicamentos inmunosupresores continúan siendo medidos por LC-MS/MS en los centros de trasplante más importantes y los métodos ahora han evolucionado para medir las muestras de pinchazos en los dedos recolectadas por el paciente en casa. Han demostrando ser una estrategia útil en la era COVID con muchas clínicas que se realizan de forma remota.
La vitamina D se convirtió en un objetivo temprano para el análisis debido al bajo rendimiento observado en los esquemas de EQA, principalmente debido a la reactividad cruzada con los metabolitos, pero la enorme carga de trabajo se ha vuelto inmanejable para algunos departamentos y muchos han vuelto a los métodos de IA. Esto ha puesto de manifiesto las principales deficiencias de LC-MS/MS en comparación con los métodos de IA establecidos: falta de automatización, equipos costosos y la necesidad de personal altamente capacitado. Otros objetivos analíticos potenciales para LC-MS/MS eran las moléculas pequeñas difíciles de medir o mal medidas por IA. Las hormonas esteroides eran candidatas obvias y se desarrollaron inicialmente como métodos de prueba únicos, pero a medida que la instrumentación LC-MS/MS ha avanzado, ahora hay una tendencia a moverse hacia paneles de múltiples esteroides. Diferencias metodológicas que incluyen instrumentación y estándares internos. Por lo general, son los esteroides que se miden con poca frecuencia (como 17OHP) los que sufren el peor rendimiento comparativo entre laboratorios.
Las mejoras en el desempeño entre laboratorios están en curso y han sido impulsadas por la creciente conciencia de que se necesitan métodos robustos y minuciosamente validados que utilicen patrones internos isotópicos de alta calidad. La producción de material de calibración comercialmente disponible en los últimos años también ha ayudado porque a los laboratorios de rutina les resulta difícil fabricar y mantener calibradores, especialmente para una amplia gama de analitos. La calidad también está respaldada por iniciativas como el CDC Hormone Standardisation Programme y el Vitamin D Standardisation Certification Programme.
Tener valores objetivo de LC-MS/MS asignados al material EQA en estos esquemas permite la evaluación del sesgo del resultado real y los valores objetivo asignados por LC-MS/MS, y han sido adoptados desde entonces por otros esquemas nacionales de evaluación externa de la calidad, por ejemplo el UKNEQAS, pero hasta ahora solo para esteroides selectos.
Se han realizado mejoras en la formulación y el rendimiento de algunos IA para abordar problemas de especificidad, pero sigue habiendo preocupaciones en torno de los métodos individuales; por ejemplo, muchos IA de estradiol tienen un desempeño deficiente cuando se mide en el rango de concentración bajo que se encuentra en niños, hombres, personas posmenopáusicas. mujeres y pacientes que toman inhibidores de la aromatasa. Es importante destacar que los métodos de LC-MS/MS no sufren problemas de reactividad cruzada con el antagonista del receptor de estrógeno fulvestrant, utilizado en el tratamiento del cáncer de mama.......
